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38
- 英文名:
Recombinant Human IFN-α2a
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
20μg
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:重组人IFN-α2a规格
英文名称:Recombinant Human IFN-α2a
产品规格:20μg
发货周期:1~3天
干扰素可分为Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型干扰素,其中IFN-α属于I型。IFN-α是由白细胞分泌的一类蛋白质,主要参与抗病毒感染的固有免疫应答。它有多种亚型及变种形式存在,其分子量范围为19-26kDa,而所有亚型均拥有第115位氨基酸残基至第151位氨基酸残基序列保守区。对于很多IFN-α亚型而言,仅存在1-2个氨基酸位点的差异。
应答病毒感染时,细胞会产生IFN-α2a。除了抗病毒作用外,IFN-α2a可诱导凋亡和炎症反应的发生,同时,它可通过增加MHC蛋白表达来提高抗原的提呈,激活细胞毒性T细胞等。
来源Yeast
分子量约19.2kDa,非糖基化多肽单链,含165个氨基酸
纯度经SDS-PAGE及HPLC检测,纯度>97%
生物学活性抗病毒实验检测比活性不低于1.0×108IU/mg
外观无菌,白色冻干粉
成分本品由溶于PBS,pH7.4的浓缩液经0.2μm滤膜后冻干所得
内毒素含量通过LAL方法检测,内毒素含量低于1EU/μg
使用方法
1)本品低温取出回温至室温,开瓶前先短暂离心以保证冻干粉皆在瓶底。
2)加入无菌ddH2O或缓冲液(含0.1%BSA)溶解,使母液浓度为0.1-1.0mg/ml。母液分装成单次用量,于≤-20℃保存。
【注】储存液2-8℃保存一周左右。长期保存需储存在-20℃或-70℃,避免反复冻融。
3)使用前,用适当的缓冲液进一步稀释到工作浓度。工作液需现配现用。
储存条件-20℃,有效期12个月
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞分成骨细胞茜素红alizarinreds染色试剂盒 免疫测定
石蜡切骨组织茜素红alizarinreds染色试剂盒 免疫测定
组织谷脱酶glutaminedehydrogenase活性比色法定量检测试剂盒 免疫测定
组织亮肽酶leucylaminopeptidase活性比色法定量检测试剂盒 免疫测定
溶酶体膜完整性integrityNAG释放法荧光检测试剂盒 免疫测定
溶酶体膜通透性LMP/完整性橙荧光检测试剂盒 免疫测定
大鼠抑制素A(INH A)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat Inhibin A ELISA Kit
大鼠绒膜促性腺激素β(βHCG)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat βHCG ELISA Kit
大鼠性激素结合球蛋白(SHBG)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat SHBG ELISA Kit
大鼠脱表雄S7(DHEAS7)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat DHEAS7 ELISA Kit
大鼠脱表雄(DHEA)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat DHEA ELISA Kit
大鼠高迁移率族蛋白1(HMGB1)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒ELISA试剂盒 Rat high mobility group box1 protein ELISA Kit
大鼠相关血浆蛋白A(PAPPA)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒ELISA试剂盒 Rat pregnancy associated plasma proteinA ELISA Kit
重组人IFN-α2a规格 化钙/钙调素依赖蛋白激酶CAMK2B/D/G抗体 COL4A3 ELISA Kit IV形胶原蛋白α3链(COL4A3)ELISA试剂盒
车前子(车前) 订购|咨询 规格 2g
肿瘤易感候选3抗体 IPO38 ELISA Kit IPO-38蛋白(IPO38)ELISA试剂盒
对 订购|咨询 规格 100mg
化CREB-1抗体 ICOSLG ELISA Kit ICOS配体(ICOSLG)ELISA试剂盒
二十二碳六稀酯 订购|咨询 规格 约1ml/支,20.4mg /支
化肿瘤易感候选3抗体 IGHG3 ELISA Kit Igγ3链C区(IGHG3)ELISA试剂盒
壬醇 订购|咨询 规格 1.0ml
化CREB-1抗体 IRAP ELISA Kit ICE蛋白酶激活子(IRAP)ELISA试剂盒
依诺星 订购|咨询 规格 200mg
化周期素依赖性激酶6抗体 COL I ELISA Kit I 型胶原蛋白(COL I)ELISA试剂盒
贝那普利 订购|咨询 规格 100mg
原癌CBL2抗体 H-Cad/CDH13 ELISA Kit H-钙粘着蛋白/H-钙粘连蛋白(H-Cad/CDH13)ELISA试剂盒
七 订购|咨询 规格 100mg
化原癌CBL2抗体 GPR152/PGR5 ELISA Kit G蛋白偶联受体152(GPR152/PGR5)ELISA试剂盒
槲叶 订购|咨询 规格 1g
操作步骤(仅供参考):
1、重组人IFN-α2a规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验单克隆抗体(McAb)亲和层析柱纯化重组人α2a干扰素(rHuIFN-α2a)
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