- 询价
- 上海研生
- YSRIBIO-C5370
- 进口、国产
- 2025年07月16日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
53
- 英文名：
DAB Peroxidase Substrate Kit for Western Blot (Purple-Blue Color)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
1KIT
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：DAB显色试剂盒紫蓝色(WB)价格
英文名称：DAB Peroxidase Substrate Kit for Western Blot (Purple-Blue Color)
产品规格：1KIT
发货周期：1～3天
本试剂盒采用液体性滴瓶包装，使用方便，并且减少了接触有潜在毒性的DAB。DAB即二氨基联（3,3’-diaminobenzidine），辣根过氧化物酶（Peroxidase）最常用的生色底物，在过氧化氢的存在下失去电子而呈现出颜色变化和积累，形成浅棕色不溶性产物，在加金属镍盐的情况下，不仅增强了显色强度，而且使显色呈鲜艳的紫蓝色，适用于免疫组化及各种印迹显色法。
产品组份
DAB浓缩液（40×）————3ml
H2O2浓缩液（40×）————3ml
TBS浓缩缓冲液（含氯镍，40×）————3ml
操作方法
1）DAB显色配制完整的DAB显色工作液，按每2ml蒸馏水加显色剂A，B，C各1滴，混匀。
2）混匀后加至膜上。
3）室温显色。一般显色1-30min。若无背景出现则可继续显色。显色后用蒸馏水洗涤以终止反应。
4）观察，照相。
储存条件-20℃，有效期一年。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
DLPhenylsuccinic acid二635518
Lithium amide锂7782890
N,N'1,3Phenylene bismaleimideN,N'间撑双马来酰亚3006937
FORMANILIDEN酰103708
3,4,5,6TETRACHLOROFLUORESCEIN3,4,5,6四荧光素6262211
2METHYLHEPTANE2庚592278
2Hydroxymethyl5bromopyridine5溴2羟88139917
LAspartic acid benzyl esterL天冬苄7362938
HASN(TRT)2CLTRT RESINHASN(TRT)2CHLOROTRITYL RESIN
Stevioside甜菊糖57817897
TUNGSTEN CARBIDE钼标准溶12070121
Dimethylsulfamoyl chloride酰13360571
Diisopropylethylamine trihydrofluorideN,N二异三131600436
Starch马铃薯淀9005258
DibenzoylLtartaric acidL()二酰2743386
多聚L赖 含量：≥ 98% 规格：20 mg/支
PolyLlysine, hydrobromide 含量：≥ 98% 规格：20 mg/支
多聚L赖 含量：≥ 98% 规格：20mg/支
PolyLlysine, hydrobromide 含量：≥ 98% 规格：5mg/支
多粘B盐 含量：≥97% 规格：5mg/支
Polymixin B Sulfate 含量：≥98% 规格：10mg/支
丽春红S (猩红S) 含量：≥98% 规格：10mg/支
Ponceau S 含量：≥98% 规格：20mg/支
DAB显色试剂盒紫蓝色(WB)价格48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
48T/96T进口、国产1620HPLC≥98%
Carbarsone48T/96T进口、国产1620CalciumSaccharateHPLC≥98%
CarbenicillinIndanylSodium48T/96T进口、国产1620CalciumStearate(AS)HPLC≥98%
48T/96T进口、国产1620CamphorHPLC≥98%
Carbidopa48T/96T进口、国产1620CandelillaWaxHPLC≥98%
48T/96T进口、国产1620CandicidinHPLC≥98%
操作步骤(仅供参考)：
1、DAB显色试剂盒紫蓝色(WB)价格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验-1:5000的稀释度，用1%BSA-PBS（含0.05%TWEEN20）稀释 ④ 显色底物缓冲液 A.HRP标记二抗底物缓冲液 DAB KIT（KPL LOT NO YM107 CAT：54-10-00）, Tris Buffer 3滴，DAB Substrate 3滴,Peroxide solution 2滴于5ml蒸馏水中，避光，混匀 B.AKP标记二抗底物缓冲液 AKP缓冲液： 0.1mol/L Tris-HCL（PH9.5）, 0.1mol/L NaCL
01 HRP 生色底物 HRP因比活高、分子量小、特异性强、稳定性好和底物范围广等优点成为最常见的酶促发光或显色的交联酶。HRP底物主要包括化学发光底物和生色底物。底物的选择需优先考虑灵敏度、背景及使用的方便性和稳定性，生色底物主要包括DAB、4-CN、CN/DAB、AEC和TMB等，其显色主要是在HRP和H2O2存在下失去电子并呈现颜色变化积累的WB检测结果。 底物 DAB 4-CN AEC TMB
显影--淬灭的祸因当抗体孵育、TBST漂洗结束后，进入ECL显影步骤。当然，目前国内一些实验室已经换用仪器扫描荧光信号，而我们更是二抗直接连荧光蛋白连ECL和常规的底片显影都省略了，因此以下所讨论的某些细节问题可能不再出现。首先坛子上还有少数实验室处于DAB显色时代，奉劝一句，都走到最后一步了就不要节省了；DAB显色的灵敏性是远远不够的。目前较为流行的仍是化学发光法，下面简述一下其原理：交联在二抗上的HRP酶能够特异水解过氧化物产生化学能；ECL中主要包含两种成分，催化剂和中间递质（白色瓶子
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
