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红细胞裂解液规格

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  • 上海研生
  • YSRIBIO-C5908
  • 进口、国产
  • 2025年07月11日
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    • 英文名

      Red Blood Cell Lysis Buffer

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海研生

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      100mL

    【培养指南】
    对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
    3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    中文名称:红细胞裂解液规格
    英文名称:Red Blood Cell Lysis Buffer
    产品规格:100mL

    发货周期:1~3天
    本产品采用了一种简便易行的方式,经配方优化保证既不破坏白细胞又能充分的将红细胞裂解去除,适用于人,大小鼠等哺乳动物新鲜血液。通常情况下,可以获得血液样品中全部白细胞的80%以上并充分保证白细胞的生物活性。

    本产品主要成分是氯化铵,即用型溶液,能快速、有效的裂解红细胞,富集分离白细胞。获得的白细胞生物活性好,可直接应用于流式细胞术,核酸或蛋白的提取,PCR等下游实验。
    操作步骤
    使用前先将低温保存红细胞裂解液平衡至室温。然后在血液样品中加入3倍体积红细胞裂解液(例如,300μl血液加入900μl红细胞裂解液),颠倒混匀,室温放置5min,期间再颠倒混匀几次,10000rpm离心1min(若是离心机最高转速不允许,可以3000rpm离心5min),吸去上清。用适当的缓冲液(如PBS,pH7.2~7.4)清洗一遍。离心后留下白细胞沉淀进行后续的操作。
    注意事项
    1)本试剂适用于从1μl到10ml的血液样品中分离白细胞,获得的白细胞可进行下游实验。
    2)为了提取到最佳的核酸或蛋白,请使用新鲜血液或保存时间低于7天的血液。如产生血凝块,将其去除。尽量采用抗凝管采集样本。
    3)通常情况下,血液样品与红细胞裂解液按13比例裂解,对一些特殊病例如白血病、红细胞增多症等,建议采用14或更高比例以保证结果。
    4)本品重要成分是氯化铵,不能保证有效裂解有核红细胞,如鸟类,爬行动物、鱼类等血液中的红细胞。
    5)本品也可用于哺乳动物组织中红细胞的裂解。
    储存条件2-8℃
    操作步骤(仅供参考):
    1、贴壁细胞的消化
    ①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
    ②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
    ③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
    化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
    ④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
    ⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
    2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

    【细胞冻存】
    红细胞裂解液规格待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
    【复苏的原则】
    产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
    细胞的种类:
    第一种:
    是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
    第二种:
    是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
    质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
    人羟脯糖蛋白HRGP定量检测试剂盒 免疫测定

    人腺苷三结合盒转运体AABCA定量检测试剂盒 免疫测定
    人脂肪结合蛋白FABP定量检测试剂盒 免疫测定
    人骨形成蛋白6BMP6定量检测试剂盒 免疫测定
    人钙结合蛋白CR定量检测试剂盒 免疫测定
    人骨退特异标志物CTX2定量检测试剂盒 免疫测定
    小鼠表皮生长子(EGF)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Mouse EGF ELISA Kit 
    小鼠肠脂肪结合蛋白(iFABP)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Mouse iFABP ELISA Kit 
    小鼠端粒酶(telomerase)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Mouse telomerase ELISA Kit 
    小鼠肌钙蛋白T()试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Mouse  ELISA Kit 
    小鼠质蛋白酶5(MMP5)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Mouse MMP5 ELISA Kit 
    小鼠质蛋白酶4(MMP4)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Mouse MMP4 ELISA Kit 
    小鼠质蛋白酶9(MMP9)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Mouse MMP9 ELISA Kit 
    红细胞裂解液规格 型酰胆受体α3抗体 CTX-Ⅰ ELISA Kit Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒

    商陆皂苷 订购|咨询 规格 20mg
     3号染色体开放阅读框33抗体 CTX-Ⅰ ELISA Kit Ⅰ型胶原C 端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒
    25--原参三醇 订购|咨询 规格 10mg
     3号染色体开放阅读框59抗体 Col Ⅰ ELISA Kit Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒
    泊金 订购|咨询 规格 20mg
     3号染色体开放阅读框39抗体 ColⅠ ELISA Kit Ⅰ型胶原(ColⅠ)ELISA试剂盒
    桤木 订购|咨询 规格 20mg
     5号染色体开放阅读框51抗体 8-isoPGF2α ELISA Kit 8异前列腺素F2α(8-isoPGF2α)ELISA试剂盒
    甾醇 订购|咨询 规格 20mg
     3号染色体开放阅读框70抗体 8-iso-PGF2a ELISA Kit 8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)ELISA试剂盒
    去泽拉木 订购|咨询 规格 20mg
     2号染色体开放阅读框68抗体 8-iso-PG ELISA Kit 8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒
    订购|咨询 规格 20mg
     2号染色体开放阅读框47抗体 8-epi-PGF2α ELISA Kit 8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA试剂盒
    环泽泻 订购|咨询 规格 20mg
    细胞培养操作规程:
    一.培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
    二.细胞处理:
    1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
    对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
    方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。


     

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