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- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
30
- 英文名：
EDTA Decalcified Solution
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100mL|500mL
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：EDTA脱钙液价格
英文名称：EDTA Decalcified Solution
产品规格：100mL|500mL
发货周期：1～3天
储存条件冷藏（2-8℃）
概述
脱钙是制作骨组织切片的重要环节，尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。为达到骨组织既充分脱钙，又保护骨组织中的抗原不被破坏，需要对含钙的组织固定之后再进行脱钙，然后再行常规制片。
EDTA与羟基磷灰石结晶的外层钙结合，形成可溶性的非离子化合物，同时又促进晶体内层的结合钙向外转移。借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融解，且pH中性时可起螯合作用。
特点
用于骨组织、牙齿等脱钙。对骨组织的损伤极小，不产生气泡，不影响染色，酶活性（碱性磷酸酶）和细胞抗原性保存较好。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
EDTA脱钙液价格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
壬聚（Y0000755 规格：;20mgErythromycin B
壬 9 - 参考谱图（N1084000 规格：;20mgErythromycin
人胰岛素（I0 10000 规格：;20mgErythritol
人血清白蛋白-用于电泳 BRP（H0900000 规格：;20mgErythorbic Acid
人破伤风免疫球蛋白 BRP（H1110000 规格：;20mgErgotaminine (List Chemical)
人牛痘免疫球蛋白（Y0000502 规格：;20mgErgosterol
人凝血子 VIII concentrate BRP （冰-20°C 运输（H0920000 规格：;20mgErgoloid Mesylates
人凝血子 VII concentrate BRP （冰-20°C 运输（Y0000667 规格：;20mgErgocalciferol (Vitamin D2)
人凝血子 IX concentrate BRP（H0920500 规格：;20mgEquilin
人免疫球蛋白-用于电泳 BRP（H1000000 规格：;20mgEpinephrine Bitartrate
人免疫球蛋白（分子尺寸BRP（Y0000488 规格：;20mgEpilactose
人免疫球蛋白 BRP（H0990000 规格：;20mgEntacapone Related Compound A
人抗D免疫球蛋白 BRP （冰-20°C 运输（Y0000219 规格：;20mgEntacapone
人肝免疫球蛋白 BRP （冰-20°C 运输（H0950000 规格：;20mgEnrofloxacin
惹18100 规格：;20mgEnflurane
EDTA脱钙液价格 20号染色体开放阅读框117抗体 T.gondii ELISA Kit 刚地弓形虫(T.gondii)ELISA试剂盒
3,29-二酰栝楼仁三醇 订购|咨询 规格 20mg
20号染色体开放阅读框118抗体 SCFR ELISA Kit 干细胞子受体(SCFR)ELISA试剂盒
表小檗 订购|咨询 规格 20mg
20号染色体开放阅读框151抗体 SCF ELISA Kit 干细胞生长子(SCF)ELISA试剂盒
富马 订购|咨询 规格 20mg
20号染色体开放阅读框144抗体 SCF/MGF ELISA Kit 干细胞子/肥大细胞生长子(SCF/MGF)ELISA试剂盒
8-滇乌（95%） 订购|咨询 规格 20mg
20号染色体开放阅读框78抗体 IFITM1/CD225/IFI17 ELISA Kit 干扰素诱导跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)ELISA试剂盒
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20号染色体开放阅读框187抗体 IP-10/CXCL10 ELISA Kit 干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA试剂盒
连翘酯苷B 订购|咨询 规格 20mg
21号染色体开放阅读框59抗体 ITAC/CXCL11 ELISA Kit 干扰素诱导T细胞趋化子(ITAC/CXCL11)ELISA试剂盒
异土木香内酯 订购|咨询 规格 20mg
20号染色体开放阅读框152抗体 IRF8 ELISA Kit 干扰素调节子8(IRF8)ELISA试剂盒
川芎对照药材 订购|咨询 规格 1g
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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产品规格：100mL|500mL
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储存条件冷藏（2-8℃）
概述
脱钙是制作骨组织切片的重要环节，尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织。为达到骨组织既充分脱钙，又保护骨组织中的抗原不被破坏，需要对含钙的组织固定之后再进行脱钙，然后再行常规制片。
EDTA与羟基磷灰石结晶的外层钙结合，形成可溶性的非离子化合物，同时又促进晶体内层的结合钙向外转移。借助这种连续性的作用使羟基磷灰石晶体逐渐融解，且pH中性时可起螯合作用。
特点
用于骨组织、牙齿等脱钙。对骨组织的损伤极小，不产生气泡，不影响染色，酶活性（碱性磷酸酶）和细胞抗原性保存较好。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
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第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
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细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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0.5M EDTA FW M L pH8.0 xg = 292.25 0.5 0.5 **93.06g** Add to about 300mls H2 O while spinning
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