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BL21甘油菌哪家好

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  • 上海研生
  • YSRIBIO-C5843
  • 进口、国产
  • 2025年07月16日
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    • 英文名

      E.coli BL 21

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海研生

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      200μl

    操作步骤(仅供参考):
    1、BL21甘油菌哪家好贴壁细胞的消化
    ①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
    ②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
    ③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
    化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
    ④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
    ⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
    2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

    【细胞冻存】
    待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
    中文名称:BL21甘油菌哪家好
    英文名称:E.coli BL 21
    产品规格:200μl

    发货周期:1~3天
    本产品是收集生长在对数期的BL21菌,加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。可以直接划平板或小量、大量培养。BL21常用于目的蛋白的原核高表达。

    注意事项
    1.使用本甘油菌时可以不必完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。
    2.为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
    储存条件-20℃,有效期一年。
    【培养指南】
    对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
    3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    【复苏的原则】
    产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
    细胞的种类:
    第一种:
    是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
    第二种:
    是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
    质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
    细胞培养操作规程:
    一.培养基及培养冻存条件准备:
    1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
    2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
    3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
    二.细胞处理:
    1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
    对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
    方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    大鼠内皮脂肪酶EL定量检测试剂盒 免疫测定

    大鼠妊娠相关血浆蛋白APAPPA定量检测试剂盒 免疫测定
    大鼠高迁移率族蛋白BHMGB定量检测试剂盒 免疫测定
    大鼠脱表雄DHEA定量检测试剂盒 免疫测定
    大鼠脱表雄S7DHEAS7定量检测试剂盒 免疫测定
    大鼠性激素结合球蛋白SHBG定量检测试剂盒 免疫测定
    大鼠谷胱甘肽过物酶(GSHPX)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat GSHPX ELISA Kit 
    大鼠同型半胱(HCY)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat HCY ELISA Kit 
    大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat LBP ELISA Kit 
    大鼠脂多糖(LPS)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat LPS ELISA Kit 
    大鼠髓样分蛋白2(MD2)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat MD2 ELISA Kit 
    大鼠α1微球蛋白(MGα1)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat MGα1 ELISA Kit 
    大鼠β2微球蛋白(MGβ2)试剂盒,ELISA分析检测试剂盒 Rat MGβ2 ELISA Kit 
    BL21甘油菌哪家好 15号染色体开放阅读框62抗体 VIM ELISA Kit 波形蛋白(VIM)ELISA试剂盒

    嗪草;品型;标准品;有证书 订购|咨询 规格 0.1g
     15号染色体开放阅读框41抗体 PCCB ELISA Kit 酰辅酶A羧化酶β多肽(PCCB)ELISA试剂盒
    恶霜灵;品型;标准品;有证书 订购|咨询 规格 0.1g
     钙连蛋白抗体 R-PK ELISA Kit 激酶R型同工酶(R-PK)ELISA试剂盒
    ;品型;标准品;有证书 订购|咨询 规格 0.1g
     环核苷阳离子通道蛋白α2抗体 PDH E1 ELISA Kit 脱酶E1(PDH E1)ELISA试剂盒
    嘧草酯;品型;标准品;有证书 订购|咨询 规格 0.1g
     二嘧啶酶相关蛋白2抗体 M2-PK ELISA Kit 激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA试剂盒
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     细胞色素P450ⅡE1抗体 PK ELISA Kit 激酶(PK)ELISA试剂盒
    成分度标准物质;有证书 订购|咨询 规格 0.25g
     趋化子受体1抗体 MGO ELISA Kit (MGO)ELISA试剂盒
    L-焦谷-对照品;有报告 订购|咨询 规格 100mg
     化原癌c-Raf抗体 malonyl CoA ELISA Kit 二单酰辅酶A(malonyl CoA)ELISA试剂盒
    低聚糖-蔗五糖;品型;标准品;有证 订购|咨询 规格 20mg

     

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      1、将重组质粒(BL21-2ß2或Rossatta-2ß2)的表达菌37℃摇培过夜后,1:20扩配(约需1h15m);2、至OD600=0.5~0.7时(约1h15min~1h45min),在15-(0.5-24,0.8-12);20-(0.5-12,0.8-8);28、25-(0.8-8)进行蛋白诱导表达,具体条件根据摇床使用情况而定;3、对诱导后的菌液4℃,4000g,20min,彻底去上清;离心前取2ml以备用于总蛋白电泳分析S1;4、细菌沉淀用BindingBuffer(无尿素,20

    • 种子培养液的配制及发酵罐的准备

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