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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
36
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
500ml
1、福尔马林-氯化钠固定液(10%)说明书贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：福尔马林-氯化钠固定液(10%)说明书
英文名称：
产品规格：500ml
发货周期：1～3天
用途
各种组织固定
注意事项
主要由甲醛、氯化钠组成。
储存条件室温，12个月
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Phenetidine对156434
Terpinyl acetate松油80262
2Bromopropiophenone2溴2114003
Ethyl Lvalinate hydrochlorideL缬17609471
4BROMO3FLUOROANISOLE4溴3458504
BENZO(B)NAPHTHO(2,3D)THIOPHENE243469
Rhodium tris(2ethylhexanoate)2铑20845925
2(Hydroxymethyl)phenylbetaDglucopyranoside水杨甙138523
2,2Dimethylsuccinic anhydride2,2二琥珀17347614
Fomesafen草72178020
Tricobalt tetraoxide四三钴/纳米钴1308061
8Aminoquinaldine8喹哪啶18978784
tertButyl acetoacetate酰叔1694311
2Pyridylacetic acid hydrochloride216179978
Triphosgene三碳32315109
DLLactic Acid 含量： 规格：5mg/支
DL锂 含量： 规格：2 mg/支
DLLactic Acid, Lithium Salt 含量： 规格：5mg/支
DL苹 含量： 规格：5mg/支
DLMalic Acid 含量： 规格：5mg/支
D甘露 含量： 规格：5mg/支
DMannitol 含量： 规格：5mg/支
D甘露糖 含量： 规格：5mg/支
福尔马林-氯化钠固定液(10%)说明书双对照品AF10/MLLT10 髓系、淋巴、混合系白血病易位10抗体OFQ/N ELISA Kit 大鼠孤腓肽免疫核糖核(Irna)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产5-尿嘧啶对照品特价供应phospho-BCAR1(Tyr410) 化癌抗雌激耐药蛋白1PP ELISA Kit 大鼠蛋白酶(LPA)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产光神霉对照品现货促销CAMK1D 钙调蛋白激酶CaMK1D抗体RBP-4(Mouse Retinol-binding protein 4) ELISA Kit 小鼠视黄醇结合蛋白4小鼠(LPA)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产霉对照品特价促销DDX43/CT13 肿瘤/抗原13抗体IL-9(Human Interleukin 9) ELISA KIT 白介9转酶/谷转酶(ALT/GPT)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产
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文献和实验1. 标本固定——不仅仅是「切一切」和「泡一泡」温柔地取材：大刀阔斧取材的同时，视组织如珍宝，莫挤压组织，轻柔取材和镊取。尽量避开坏死区域。太大太厚的组织不利于均匀一致的固定，实质组织取材厚度应小于 5 mm。新鲜的固定液： 固定液 10% 中性缓冲福尔马林 (NBF) 需新鲜配置，商用型固定液注意其标注的有效期，避免使用过期变质的固定液。充分及时地固定：固定液要充足，其与组织的体积比最好大于等于 20 倍；取材后即刻固定。固定时需将瓶口封住，避免甲醛挥发。组织的固定时间不宜过长，一般过夜（12～24
4H5N.HI+C5H5N.HSO4CH3根据滴定反应中所消耗的卡尔-费休试剂量来算出样品中水份的含量。二、仪器性能及适应范围：1、仪器性能： a、测量范围：30×10-6～100%。 b、以水为标样，测定卡尔-费休试剂的水当量，平行测定相对误差≤3%。 c、电源电压：交流220±10%。2、适应范围：本仪器主要用于测定化肥、医药、食品、轻工、化工原料以及其它工业产品中的水份含量。根据资料及美国材料协会标准ASTM，使用卡尔-费休法可直接测定的化合物包括： 有机化合物-饱和的不饱和的碳氢
从组织中提取总RNA1)液氮研磨，组织块直接放入研体中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液氮，再研磨，如此三次，按50-100mg组织/mlTrizol加入Trizol，转移入离心管进行第2步操作。2) 匀浆：组织样品按50-100mg/mlTrizol 加入Trizol，另外，组织体积不能超过Trizol体积的10%，否则匀浆效果会不好，用电动匀浆器充分匀浆约需1-2分钟。从细胞中提取总RNA1) 培养贴壁细胞：不须消化，可直接用Trizol进行消化、裂解，Trizol体积按10
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