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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
37
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
1包
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:BSATBS缓冲系统封闭液(干粉)说明书
英文名称:
产品规格:1
发货周期:1~3天
产品保存4℃保存,半年有效
产品特点
1.相容性好,可用于其它的免疫检测封闭。
2.快速。
3.高信噪比,背景更干净。
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Zinc cobalt ferrite,compound复合铁钴
1Amino8hydroxynaphthalene3,6disulphonic acid183,6二90200
TRIPALMITIN三棕榈甘油555442
Benzophenone imine二亚1013883
1,2Dinitrobenzene1,2二528290
6Aminonicotinic acid6烟3167495
2tertbutyl1,4dimethoxybenzene2叔1,4二21112378
NAFluo3钙离子荧光探针
6Quinolinylmethanol6羟100516889
cisAnethol茴香脑104461
19HYDROXY4ANDROSTENE3,17DIONE19羟雄甾43,17二510645
DHOMOPHENYLALANINE ETHYL ESTER HYDROC&D高90940548
3Nitrotoluene336373
4(Trifluoromethoxy)benzenesulfonamide4三酰1513457
(R)4AMINO3PHENYLBUTANOIC ACID(R)4335568366
Gelatin 含量:≥ 98% 规格:20mg/支
染料木黄 含量:≥ 98% 规格:20mg/支
Genistain 含量:≥ 98% 规格:20mg/支
庆大 含量:≥ 98% 规格:20mg/支
Gentamycin Sulfate 含量:≥ 98% 规格:20mg/支
姬姆氏色素 含量:≥ 98% 规格:20mg/支
Giemsa Stain 含量:≥ 98% 规格:20mg/支
葡萄糖酶 含量:≥98% 规格:5mg/支
BSATBS缓冲系统封闭液(干粉)说明书HDHD1HDHD1蛋白抗体大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒14176502
HDHD2/IER3IP1HDHD2蛋白抗体大鼠CXC趋化子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒108050540
HDHD3HDHD3蛋白抗体大鼠高敏三状腺原(uT3)ELISA试剂盒26921175
HDHD2B/LHPPHDHD2B蛋白抗体大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA试剂盒65899732
HEATR3HEATR3蛋白抗体大鼠胱天蛋白酶9(Casp9)ELISA试剂盒61709339
HEATR6腺癌增强蛋白抗体大鼠阿立新A(OrexinA)ELISA试剂盒
Proteasome19SS5A26S蛋白酶调节亚型S5a抗体大鼠胱天蛋白酶3(Casp3)ELISA试剂盒
操作步骤(仅供参考):
1、BSATBS缓冲系统封闭液(干粉)说明书贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验注意事项 1.认真阅读说明书。说明书都注明干粉不包含的成分,常见的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。这些成分有些是必须添加的,如NaHCO3、谷氨酰胺,有些根据实验需要决定。2.配制是要保证充分溶解,NaHCO3、谷氨酰胺等物质都要等培养基完全溶解之后才能添加。3.配制所用的水应是三蒸水,离子浓度很低。4.所用器皿应严格消毒。5.配制好的培养基应马上过滤,无菌保存于4度。6.液体培养基主要是为了科研工作的方便而设计的培养基,它是一种灭菌后保证无菌的溶液,必要时可制成无内毒素
. (Positive pressure recommended)*pH unite will usually rise 0.1-0.3upon filtration.另外,在李玲、李雪峰编著的《细胞生物学实验》(湖南科学技术出版社)中配制方法如下: 1、制备新鲜三蒸水或Millipore超纯水。 2、称取所需量的干粉培养基,加入约终体积一半的三蒸水中;若配制一个包装的培养液,在将整个包装的干粉倒入三蒸水后,需用水洗包装袋内面2次,倒入培养液中,以保证所有干粉都溶解成培养液。磁力搅拌或人工搅拌使之完全溶解
1、保存在2-8度干燥环境,避光。 2、称量出比最终容积小5%的蒸馏水,混合的容器尽可能接近最终容积。 3、将干粉加入到室温15到30度的水中,轻柔搅拌,勿用热水。 4、冲洗出包装袋内所有干粉。 5、每升培养基加入2.2g碳酸氢钠。 6、用水稀释至最终的容积,搅拌直至溶解。不要过分混合。 7、调整pH值比最后的培养用的pH值要低0.2到0.3(过滤后pH值一般要升高0.1到0.3):用1N NaOH 和 1N HCl,边搅拌边缓慢添加。调整pH值完毕后,封闭容器,直至过滤
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