WB转印滤纸(12.5cm×12.5cm，100张/包)说明

培养操作步骤：
1．WB转印滤纸(12.5cm×12.5cm，100张/包)说明书用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
中文名称：WB转印滤纸(12.5cm×12.5cm，100张/包)说明书
英文名称：
产品规格：100张
发货周期：1～3天
WesternBlotting快速高效蛋白转移垫
产品保存常温保存，一年有效
产品说明
Westernblot技术是在研究实验室常规和通用的一项技术，其伴有三个主要缺点。第一，转移蛋白至蛋白结合膜花费时间太长;第二，转移效率不恒定;第三，转移高分子量蛋白会出现一些问题。其它的缺点包括转移设备过热，由于电流过大引起电能不足和印迹三明治组装杂乱等。
根据顾客长期反馈的要求，目前向科研工作者推出快速高效转移垫，能够有效解决上述的问题．每块转移垫减少转移时间大于50%,并且持续高效率的转移。该项产品在不影响转移效率的前提下，允许使用较低浓度的转移缓冲液，从而避免了过热和电能不足。本转移垫在技术上结合了半干转移的方便和湿转的高效性，明显减少了缓冲液的使用量。
选用此有效垫，确保了你的Westernblot高度有效，快速简便,避免了大分子蛋白转移过程引起的各种问题。
实验报告：
一、分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项：
      尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品：
Swertiamarine獐牙菜苦甙17388395
1NAPHTHYLAMINE3,6,8TRISULFONIC ACID DISODIUM SALT HYDRATE81,3,6三二5398345
Nickel oxide三二镍1314063
1,2Dibromopropane1,2二溴78751
Bullatine B雪上一枝蒿素466262
Dimethyl isophthalate间二二1459934
Diisooctyl sebacate二二异27214900
ISOPROPYLMAGNESIUM BROMIDE异溴镁920398
1,2,5,6,9,10Hexabromocyclododecane六溴环十二3194556
2CYANOETHYLTRIETHOXYSILANE3三硅919313
Furfuryl acetate糠623176
N,NDIETHYLPPHENYLENEDIAMINE MONOHYDROCHLORIDEN,N二对2198585
Lanthanum(III) nitrate hexahydrate镧10277437
4NITROPHENYLALPHADGLUCOPYRANOSIDE对αD葡萄糖苷3767280
1Naphthylacetamide1酰86862
LNAME(eNOS抑制剂)　含量：暂不提供　规格：250U，500U
NωNitroLarginine methyl ester hydrochloride　含量：暂不提供　规格：250U，500U
邻联茴香　含量：暂不提供　规格：250U， 500U
oDianisidine　含量：暂不提供　规格：250U，500U
二盐邻联茴香　含量：暂不提供　规格：250U，500U
oDianisidine, dihydrochloride　含量：暂不提供　规格：250U，500U
沙星　含量：暂不提供　规格：1ml，3ml
Ofloxacin　含量：暂不提供　规格：1ml，3ml
WB转印滤纸(12.5cm×12.5cm，100张/包)说明书Agigenin48T/96T进口、国产1620GlacialAceticAcidHPLC≥98%
5-AdenylicAcid48T/96T进口、国产1620AcetohexamideHPLC≥98%
Agnuside48T/96T进口、国产1620AcetohydroxamicAcidHPLC≥98%
BetaAlanine48T/96T进口、国产1620AcetoneHPLC≥98%
L-Alanine48T/96T进口、国产1620AcetophenazineMaleateHPLC≥98%
Albendazole48T/96T进口、国产1620HPLC≥99%
48T/96T进口、国产1620AcetylcholineChlorideHPLC≥98%