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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
详见说明书
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 库存:
60
- 英文名:
小鼠星型胶质细胞
- 生长状态:
贴壁
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
成纤维样
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
脑
- 规格:
详见说明书
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
以下是产品信息的认购信息:
产品名称: 小鼠星型胶质细胞规格
商品货号: EY-Z6772
中文名称: 小鼠星型胶质细胞
种属来源:小鼠
组织来源:脑
细胞形态:成纤维样
生长特性:贴壁
培养条件:高糖DMEM
细胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
细胞传代步骤:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1.
细胞复苏步骤:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
培养步骤:
小鼠星型胶质细胞规格对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线。
侧金盏花醇,100g Senegenin 规格:HPLC≥98%,标准品"
侧金盏花醇,1g Selenophene 规格:>98.0%(GC)
侧金盏花醇,25g Selenium (IV) oxide 规格:>98%,Pract Grade
侧金盏花醇,5g Selegiline HCl 规格:>98%,MAO-B selective inhibitor
十二烷基吡喃葡萄糖苷,100mg Securinine 规格:HPLC≥98%,对照品
十二烷基吡喃葡萄糖苷,1g Secretin Acetate 规格:>98%,BR
十二烷基-β-D-麦芽糖苷,1g Secoxyloganin 规格:HPLC≥98%,标准品
十二烷基-β-D-麦芽糖苷,250mg Secoisolariciresinol Diglucoside 规格:HPLC≥98%,标准品
3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷,100mg Sec-O-Glucosylhamaudol 规格:HPLC≥97%,标准品
L-苏氨酸,1kg Iodine solution 规格:1000μg/ml,溶剂:水
L-苏氨酸,25g Iodine 规格:>99.5%,AR
D-苏氨酸,100g Inulin from chicory 规格:>90%,BR
D-苏氨酸,1g Interleukin-1β Convertase Substrate 规格:>95%,BR
D-苏氨酸,25g Insulin-Like Growth Factor II(69-84) 规格:>95%,BR"
D-苏氨酸,5g Insulin-like Growth Factor I (57-70) 规格:>95%,BR
DL-苏氨酸,100g INSULIN 规格:BR,来源猪胰脏
DL-苏氨酸,10g INSULIN 规格:BR,27U/mg,进分
DL-苏氨酸,25g INSULIN 规格:BR,27U/mg,进分
小鼠星型胶质细胞规格KIF15 驱动蛋白家族成员15抗体规格 0.2ml
Kif14 protein 驱动蛋白家族Member14蛋白抗体规格 0.2ml
KIF11/Eg5/TRIP5 驱动蛋白样蛋白1抗体(甲状腺激素受体相互作用蛋白5)规格 0.2ml
Kidins220 220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗体规格 0.2ml
KIAA1576/VAT1L 囊泡胺转运蛋白1家族蛋白抗体规格 0.2ml
KIAA1522 KIAA1522蛋白抗体规格 0.2ml
Ki-67 (Proliferation Mar
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文献和实验,种植于75cm 2 培养瓶,经1小时差速黏附去除成纤维细胞后,将细胞悬液转移到一新的75cm2培养瓶继续培养,两天换液一次。 7天后将培养瓶放入水平摇床,260rpms 2小时 37℃,换液弃除小胶质细胞,放入培养箱平衡1小时,重新置于水平摇床,260rpms 18小时37℃,换液弃除少突胶质细胞,用新鲜培养基洗2遍,加入0.25%胰蛋白酶与0.02% EDTA1:1混合液消化、传代备用。
实验步骤 1. 小鼠用pH值7.4,0.1M PBS彻底穿心灌注。 2. 用剪刀去头。 3. 剥开头骨的软组织。 4. 除去下颌骨。 5. 除去头骨延髓到上颌骨之间的组织。 6. 手术剪刀,取出头骨顶部,顺时针方向切割,开始和结束于右后鼓膜钩。 7. 舀出大脑,维持组织的完整性。 8. 立即将脑组织置于预冷的流式细胞术缓冲液中(1%BSA 1mM的EDTA的 pH值7.4 0.1M PBS,50
实验步骤 为了检测小胶质细胞的吞噬功能,利用凋亡的神经祖细胞作为目标,因为在体外环境下它能最模拟自然条件下小胶质细胞的吞噬目标。 1. 将神经祖细胞(NPC)置于0.1M PBS 2mg/ml木瓜蛋白酶(Worthington)溶液中进行分离,37ºC作用30min。 2. 将分离的NPC 在紫外光下处理15-20min。 注:此步应该在一个很薄的塑料培养皿中进行,厚的塑料(如15或50毫升锥形管)将阻止
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