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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 细胞类型:
详见说明书
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 库存:
40
- 英文名:
鸭子胚胎成纤维细胞
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
成纤维母细胞样
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 规格:
详见说明书
产品名称: 鸭子胚胎成纤维细胞规格
商品货号: EY-Z6916
中文名称: 鸭子胚胎成纤维细胞
规格:T25
形态特征:成纤维母细胞样
生长特性:贴壁生长
细胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
培养条件:FM培养基
传代方法:1:2传代
冻存条件:无血清细胞冻存液
细胞传代步骤:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1.
细胞复苏步骤:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
培养:
1.取出小鼠后沥干酒精,放入超净台内,固定在泡沫板上。
2.用镊子提起皮肤,用解剖剪剪开皮肤一个横切口,将皮肤向上撕开,然后剪开肌肉等,暴露出腹腔,在左侧找到脾脏,用弯头眼科镊取出脾脏,置于无菌培养皿中。
3.用生理盐水将取出的脾脏清洗多次,并剔除多余无用的组织。
4.将筛网置于平皿中,脾脏置于筛网上,用弯头镊镊住,轻轻在筛网上进行碾磨,同时不停滴加不含血清的培养液冲洗。
5.将碾磨好的细胞悬液吸入至离心管中,离心(1000rpm,5min),吸去上清(去除血液等)。
6.加入10ml培养液,吹打混匀,取样计数。
7.将稀释好的细胞悬液分装于培养瓶中,轻轻摇晃混匀,在培养瓶上。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象
实验事项:
1. 鸭子胚胎成纤维细胞规格试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
2. 加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。
5. 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。
以下是公司正在促销的产品:
盐酸黄连碱coptisine chloride (≥98%,HPLC)6020-18-420MG标准品
胡黄连苷IPicroside I (≥98%,HPLC)27409-30-920MG标准品
(Mouse IL-12p40 ELISA KIT 96T 中文名称小鼠白介素12P40检测试剂盒 英文名称Mouse IL-12P40 ELISA KIT 反应性Mouse 样品类型Serum, plasma, Cell culture supernatant 灵敏度7 pg/ml 检测目标IL-12/IL-23 p40 应用Sandwich ELISA
Rat TGF-β 1 ELISA KIT 96T 中文名称大鼠转化生长因子β1检测试剂盒 英文名称Rat TGF-β 1 ELISA KIT 反应性Rat 样品类型Serum, plasma, Cell culture supernatant 灵敏度15.6 pg/ml 检测目标TGF-β 1 应用Sandwich ELISA
Human IL-4 ELISA KIT 96T 中文名称人白细胞介素4检测试剂盒 英文名称Human IL-4 ELISA KIT 反应性Human 样品类型Serum, plasma, Cell culture supernatant 灵敏度4 pg/ml 检测目标IL-4 应用Sandwich ELISA
芍药苷 订购|咨询 EPBV IgG 乙型脑炎病毒 IgG(间接法二步法) 规格: HPLC≥98%;20mg/vial
2,3,5,4'-四羟基二乙-2-O 订购|咨询 EPBV IgM 乙型脑炎病毒 IgM(间接法二步法) 规格: HPLC≥98%,20mg/vial
二基酰基香豌豆 订购|咨询 Beta-HCG 人绒毛膜促性腺激素(夹心法一/二步法) 规格: HPLC≥98%,20mg/vial
原人参二 订购|咨询 IL-1 Beta ELISA Kit 鱼类白介素1β 规格: HPLC≥98%,20mg/vial
D-无水葡萄糖 订购|咨询 Plg (Rabbit Plasminogen) ELISA Kit 兔子纤溶酶原 规格: HPLC≥98%,100mg/vial
柴胡皂苷 C 订购|咨询 Mouse Cluster of differentiation 19,CD19 ELISA Kit 小鼠CD19分子 规格: HPLC≥98%,20mg/vial
人参皂苷 F1 订购|咨询 GlyCAM-1(Human glycosylation-dependent cell adhesion molecule-1) ELISA Kit 人糖基依赖的细胞黏附分子 规格: HPLC≥98%,20mg/vial
钓樟内酯 订购|咨询 FGF-10(Rat fibroblast growth factor-10,FGF-10 )ELISA Kit 大鼠成纤维细胞生长因子10 规格: HPLC≥98%,20mg/vial
鸭子胚胎成纤维细胞规格Goat Anti-Bovine IgG/Bio 生物素标记的羊抗牛IgG规格 0.1ml
Goat Anti-Bovine IgG/APC APC标记的羊抗牛IgG规格 0.1ml
Goat Anti-Bovine IgG/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的羊抗牛IgG规格 0.1ml
Goat Anti-Bovine IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的羊抗牛IgG规格 0.1ml
Goat Anti-Bovine IgG/Alexa Fluor 555
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文献和实验一、实验器材: 手术小直剪刀三把、眼科直镊子三把、眼科弯镊子两把、玻璃平 皿三套、200目尼龙滤网、50ML、15ML离心管和手术刀片。以上物品均需要高压灭菌消毒处理。 二、实验试剂: 无Ca+2和Mg+2的PBS、0.05%胰酶0.53mmol/L EDTA溶液、小鼠胚成纤维细胞(MEF)生长培养基:高糖DMEM加10%FCS。 三、实验
小鼠胚胎成纤维细胞的富集1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后,实施断颈法处死小鼠。2、用70%乙醇擦拭腹部,把皮肤向后拉,暴露出腹膜。用消毒过的工具,剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。3、用剪刀剪开每一测的胚囊,并将胚胎移到培养皿中。4、用两副钟表镊子将胎盘和膜与胚胎分离开,分离后切除内脏(所有深色的东西)。将胚胎转移到(有盖)培养皿中,用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。5、用带有弯钩的眼科剪将组织剪碎,当你剪
小鼠胚胎成纤维细胞的富集 1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后,实施断颈法处死小鼠。 2、用70%乙醇擦拭腹部,把皮肤向后拉,暴露出腹膜。用消毒过的工具,剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。 3、用剪刀剪开每一测的胚囊,并将胚胎移到培养皿中。 4、用两副钟表镊子将胎盘和膜与胚胎分离开,分离后切除内脏(所有深色的东西)。将胚胎转移到(有盖)培养
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