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转入Tet-off调控,含EGFP基因的CHO细胞说明书

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  • 上海一研
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  • 2025年07月14日
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    • 供应商

      上海一研

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    • 英文名

      转入Tet-off调控,含EGFP基因的CHO细胞

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      电询

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    • 相关疾病

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    • 规格

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    培养:
    1.取出小鼠后沥干酒精,放入超净台内,固定在泡沫板上。
    2.用镊子提起皮肤,用解剖剪剪开皮肤一个横切口,将皮肤向上撕开,然后剪开肌肉等,暴露出腹腔,在左侧找到脾脏,用弯头眼科镊取出脾脏,置于无菌培养皿中。
    3.用生理盐水将取出的脾脏清洗多次,并剔除多余无用的组织。
    4.将筛网置于平皿中,脾脏置于筛网上,用弯头镊镊住,轻轻在筛网上进行碾磨,同时不停滴加不含血清的培养液冲洗。
    5.将碾磨好的细胞悬液吸入至离心管中,离心(1000rpm,5min),吸去上清(去除血液等)。
    6.加入10ml培养液,吹打混匀,取样计数。
    7.将稀释好的细胞悬液分装于培养瓶中,轻轻摇晃混匀,在培养瓶上。
    产品名称: 转入Tet-off调控,含EGFP基因的CHO细胞说明书
    商品货号: EY-Z6678
    中文名称: 转入Tet-off调控,含EGFP基因的CHO细胞
    细胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。

    细胞传代步骤:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1.
    细胞复苏步骤:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
    细胞冻存步骤:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
    细胞培养的优点:
    1.研究的对象是活细胞
    在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
    2.研究条件可以人为控制
    pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
    3.研究的样本可以达到比较均一性
    通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
    4.研究内容便于观察、检测和记录
    采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  
    记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
    5.研究的范围比较广泛
    应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等; 
    适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
    6.研究的费用相对较经济
    可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象
    实验事项:
    1. 转入Tet-off调控,含EGFP基因的CHO细胞说明书试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
    2.   加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育"时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。
    3.   孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
    4.   洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响后的酶标仪读数。
    5.  试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
    6.  反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
    7.  底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
        建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
        如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请后乘以稀释倍数。

    转入Tet-off调控,含EGFP基因的CHO细胞说明书现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,同时我司为您提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,都可以免费再向客户提供一次。
    以下是公司正在促销的产品:
    抗蛋白酶,5mg  Trimethyl[3-(triethoxysilyl)propyl]ammonium Chloride 规格:>98.0%(T)

    胆固醇酯酶,100u  Trimethyl phosphate 规格:分析标准品
    糖化酶,250g  Trimethyl Citrate 规格:>98.0%(GC)
    糖化酶,100ml  Trimethoprim lactate salt 
    乙酰辅酶A,10mg  Trimethoprim 规格:>99.5%,超纯,BP2010,BR,可用于细胞培养
    乙酰辅酶A,1mg  Trimethoprim 规格:HPLC>98%,标准品
    乙酰辅酶A,50mg  Trimetazidine Hydrochloride 规格:含量测定"
    乙酰辅酶A,5mg Trimetazidine dihydrochloride 规格:>97%,EP
    葡萄糖氧化酶,10ku  Trimellitic Anhydride 规格:>95.0%(T)
    四溴酚兰,1g  Mizolastine 规格:HPLC法含量测定"
    四溴酚兰,5g Mitoxantrone HCl 规格:进分sigma M6545
    伊文斯蓝,100g  Mitoxantrone HCl 规格:>98%,USP,可用于细胞培养
    伊文斯蓝,10g  Mitoxantrone HCl 规格:HPLC>98%,标准品
    伊文斯蓝,1g  Mitoxantrone 规格:HPLC>97%,BR
    硝基氯化四氮唑蓝,1g  Mitotane;O,P'-DDD 规格:含量测定
    硝基氯化四氮唑蓝,250mg  Mitiglinide calcium Hydrate 规格:>99%,BR
    硝基氯化四氮唑蓝,5g  Mitiglinide calcium Hydrate 规格:HPLC>98%,标准品
    氯化硝基四氮唑蓝,1g  Mitiglinide Calcium 
    转入Tet-off调控,含EGFP基因的CHO细胞说明书Mouse Anti-human IgG(3D3)/Gold  胶体金标记的鼠抗人IgG单克隆抗体规格 0.5ml

    Mouse Anti-human IgG(3D3)/FITC  FITC标记的鼠抗人IgG单克隆抗体规格 0.1ml
    Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy7  Cy7标记的鼠抗人IgG单克隆抗体规格 0.1ml
    Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy5.5  Cy5.5标记的鼠抗人IgG单克隆抗体规格 0.1ml
    Mouse Anti-human IgG
     

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