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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
56
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
200ml/KIT
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称 骆驼组织中性粒细胞分离液试剂盒哪里有买
规格: 200ml/KIT
储存条件 2-8℃
单位 盒
1. 悬浮细胞,2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎,造成假阳性,过短,细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶消化液,加入细胞培养液终止消化,2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS,洗涤细胞2次(2000rpm x 5min),收集细胞2~5×105 。
3. 离心弃上清,加入500μL结合缓冲液,轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC,轻轻吹打混匀,加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许,可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
骆驼组织中性粒细胞分离液试剂盒哪里有买尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
50T 登革热病毒Ⅰ、Ⅱ型PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
乙肉汤 Acetamide broth 250g
1 管 SMD1168H酵母菌 SMD1168H Yeast Strain -80℃保存
2 ug pSilencer 1.0 pSilencer 1.0 低温运输,-20℃保存
亚碲酸钾(亚碲酸盐肉汤配套试剂) 每支含亚碲酸钾2mg,添加于100ml(024012)中可配成亚碲酸盐肉汤培养基。 2mgX10支
产组胺菌培养基 英文名称:Histamine producing bacteria Medium 产品规格:250g
1000mL 超快蛋白银染试剂盒 Rapid Silver Stain for Protein 常温保存
250mL Succinate Buffer(琥珀酸缓冲液),0.2M,pH6.5 Succinate Buffer,0.2M,pH6.5 常温保存
蜡样芽孢杆菌检验培养基
50ng 可保种型蓝白T载体 Blue-White Vector T -20℃保存
2 ug pAP1(PMA)-Luc pAP1(PMA)-Luc 低温运输,-20℃保存
50T 肺炎衣原体PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
细菌L型增菌液 英文名称:Bacterial L-growing Broth 产品规格:65g
30次 一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒 One-Step Cytoplasmic Protein Miniprep Kit 4℃保存
100mL Phosphatase Buffer-1,2X Phosphatase Buffer-1,2X 常温保存
四酸盐煌绿增菌液基础(TTB) Tetrathionate Broth Base 250g
5次 DAB法生物素杂交试剂盒
骆驼组织中性粒细胞分离液试剂盒哪里有买甘草酸二铵盐 Diammonium Glycyrrhizate 79165-06-3 质量规格:UV≥97%,BR
Ginsenoside Re 人参皂苷Re 51542-56-4 20mg
4-磺酰杯[6]芳烃水和物(>95.0%(HPLC)) 4-Sulfocalix[6]arene Hydrate 102088-39-1 质量规格:>95.0%(HPLC)
1-十三烷钠[离子对色谱级] IPC-ALKS-13 02-89-1 质量规格:离子对色谱用试剂
NP-40 LYSIS BUFFER 裂解液 5ml 瓶
螺旋霉素(标准品) Spiramycin 8025-81-8 质量规格:含量测定,标准品
烟嘧磺隆(标准品) Nicosulfuron 111991-09-4 质量规格:分析标准品
正己醇(Standard for GC,>99.5%(GC)) 1-Hexanol 111--3 质量规格:Standard for GC,>99.5%(GC)
双酚 C(>98.0%(GC)) 2,2-Bis(4-hydroxy-3-methylphenyl)propane 79-97-0 质量规格:>98.0%(GC)
细胞过滤筛(不锈钢) 3目 个
Sirolimus 雷帕霉素 53123-88-9 20mg
羟基匹格列酮(M-Ⅱ)(非对映异构体混合物) Hydroxy Pioglitazone (M-II) (Mixture of Diastereomers) 101931-4 质量规格:美国进口
细胞过滤筛(不锈钢) 70目 个
托可索仑/维生素E聚乙二醇琥珀酸酯 Tocofersolan,VE-TPGS 92-96-4 质量规格:VE含量≥260.mg/g as dl-α-tocopherol
丙卡巴肼(标准品) Procarbazine HCl 3-70-1 质量规格:HPLC>98%,标准品
TAN[=1-(2-噻唑偶氮)-2-萘酚](>99.0%(T)) TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol] 1147-56-4 质量规格:>99.0%(T)
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