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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
38
- 英文名:
Paraformaldehyde-glutaraldehydeFixativeSolution(2%/2.5%)
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ml
产品名称 固定液(2%/2.5%)多少钱
规格: 100ml
英文名称 Paraformaldehyde-glutaraldehydeFixativeSolution(2%/2.5%)
储存条件 2-8℃,避光,有效期1年
产品简介:
组织和细胞常用的固定液,尤其适用在电镜中保护超微结构,不适用于固定核酸、多糖物质。
使用说明:
离心收集细胞,PBS漂洗两遍,2%-2.5%固定液固定30min-1h,PBS漂洗两遍,用于后续实验。
保存:2-8℃,避光保存,有效期12个月。
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
25g N-2- 羟乙基 -N’-2- 乙基钠 HEPES,Sodium Salt 室温保存
2 ug pGBK-53 pGBK-53 低温运输,-20℃保存
250mL PIPES Buffer,1.0M, pH6.8 PIPES Buffer,1.0M, pH6.8 常温保存
波尔顿选择性肉汤 英文名称:Bolton Broth 产品规格:250g
0.5mL dGTP溶液,100mM dGTP Solution -20℃保存
庆大霉素(100IU)和亚碲酸钾(1mg)混合液 1ml*5支/盒
酵母提取粉 培养基原材料 BR 400g
改良马丁培养基 英文名称:Martin Broth,Modified 产品规格:250g
2 ug pEF1a-hyPBase pEF1a-hyPBase 低温运输,-20℃保存
100mL Imidazole Buffer(咪唑缓冲液),0.5M,pH6.5 Imidazole Buffer,0.5M,pH6.5 常温保存
吲哚培养基(蛋白胨水) 英文名称:Indole Medium 产品规格:10g
10mL DNA 非变性PAGE上样液 DNA Native-PAGE Loading Buffer -20℃保存
200U ATP依赖的DNase ATP Dependent DNase -20℃保存
氨基酸脱羧酶试验基础培养基 供鉴别肠道菌属能否产生氨基酸脱羧酶用 100g
0.1%溶菌酶溶液 英文名称: 产品规格:1ml*5
2 ug pcDNA3.1(-)/Myc-His A pcDNA3.1(-)/Myc-His A 低温运输,-20℃保存
100mL Bicine Buffer,0.5M,pH8.5 Bicine Buffer,0.5M,pH8.5 常温保存
固定液(2%/2.5%)多少钱Xanthosine-5'-Monophosphate disodium salt 黄苷-5'-单磷酸钠 299-70-1 50mg
马来酰肼(>98%,植物激素级) MH, maleic hydrazide 123-33-1 质量规格:>98%,植物激素级
雷公藤次碱(标准品) Wilforine 11088-09-8 质量规格:HPLC≥98%,标准品
α-促黑激素,黑素皮质素 α-MSH 1-05-5 质量规格:>95%
化铵(>99%,BR) Ammonium bromide 124-97-9 质量规格:>99%,BR
α-基-L-丙氨酸 α-Methyl-L-phenylalanine 23239-35-2 质量规格:98%,BR,一水物
维生素D3 1g 瓶
4-叔丁基硫杂杯[4]芳烃(>98.0%(HPLC)) 4-tert-Butylthiacalix[4]arene 182496-55-5 质量规格:>98.0%(HPLC)
Fmoc-N'-基三基-L-赖氨酸 Fmoc-Lys(Mtt)-OH 167393-62-6 质量规格:0.98
4,4'-(4H-1,2,4-Triazol-4-ylmethylene)bis benzonitrile (来曲唑相关杂质A) 4,4'-(4H-1,2,4-Triazol-4-ylmethylene)bis benzonitrile (Letrozole Related Compound A) 112809-52-6 质量规格:美国进口
加替沙星(标准品) Gatifloxacin 112811-59-3 质量规格:HPLC>99%,标准品
3-基-7-氧基-1,4-并恶嗪-2-酮(>98.0%(T)) 3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one 124522-09-4 质量规格:>98.0%(T)
洛沙坦三基醚 Losartan Trityl Ether 16062-28-7 质量规格:美国进口
红景天苷(标准品) Salidroside 10338-51-9 质量规格:HPLC≥98%,标准品
长春碱(标准品) Vinblastine Sulfate 143-67-9 质量规格:HPLC>98%,标准品
牛磺胆酸钠(标准品) Taurocholic acid Sodium Salt 145-42-6 质量规格:TLC≥97%,标准品
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文献和实验7.2~7.4,最后,补充蒸馏水至1000ml充分混合,4℃冰箱保存备用。该固定剂适于光镜和电镜免疫细胞化学研究,用于免疫电镜时,最好加入少量新鲜配制的戊二醛,使其终浓度为0.5%~1%。该固定剂较温和,适于组织的长期保存。组织标本于该固定液中,4℃冰箱保存数月仍可获得满意的染色效果。3、Bouin's液及改良Bouin’s液试剂:饱和苦味酸40%甲醛 250ml冰醋酸 50ml配制方法:先将饱苦味酸过滤,加入甲醛(有沉淀者禁用),最后加入冰醋酸,混合后存于4℃冰箱中备用。冰醋酸最好在临用前加入
蛋白从膜表面转移到胞浆中,故应选择冰冷的无水甲醇或无水乙醇,同时应注意甲醛会挥发,在4-8°C不宜储存太久。 固定时间:取决于组合块的大小和类型,对于大多数组织,18-24h较为理想,细胞固定时间较短,一般2%的甲醛室温固定20min即可。 2. 透化 通透的目的是使抗体进入胞内。0.5% Triton X-100 室温通透20 min(针对胞内抗原,若是细胞膜上表达的抗原则省略该步骤);除了Triton X-100,丙酮也可作为通透剂,并且丙酮固定后的样品不需要通透。 3. 封闭 封闭可减少
呈现褐色为止,一般3—4min。 3.自来水流洗去盖片和染料,空气中晾干。 4.镜检。 四、注意事项 如银染的染色体形态过浅,可用2% Giemsa复染1—3min. 人体间期细胞X—小体的制备 一、原理 1949年Barr等发现,在雌性体细胞中的两条X染色体有一条(或这条的大部分)处于凝集不活动状态,从而形成X-小体(或称X-染色质、性染色质、Barr小体)。进而发现,所有哺乳类雌体细胞中都有一条这种表现的X染色体,当在个用雌或雄体中,有多于2条X染色体时,在间期细胞
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