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43
- 英文名:
N2
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
5ml
规格: 5ml
英文名称 N2
储存条件 -20℃
单位瓶
货期现询
N-2添加剂是化学成分确定的,不含血清的,基于Bottenstein’s的N1配方的添加剂。N-2添加剂主要用于Neurobasal?培养基。
它主要被推荐用于成神经细胞瘤以及周围神经系统(PNS)与中枢神经系统(CNS)的原代细胞培养中有丝分裂后期神经元的生长和表达。N-2添加剂可以替代Bottenstein’s的N1添加剂。我们提供的N-2添加剂是100倍的浓缩体。它可用于添加了生长因子bFGF及EGF的Neurobasal?培
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
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100g 9,10- 二甲基 -1,2 并蒽 DMBA(9,10-Dimethyl-1,2-Benzanthracene) 常温保存
2 ug pET-44 Ek/LIC pET-44 Ek/LIC 低温运输,-20℃保存
250mL MOPS Buffer,1.0M,pH7.5 MOPS Buffer,1.0M,pH7.5 常温保存
沙氏BHI琼脂 英文名称:Sabouraud BHI Agar 产品规格:250g
10g 胃蛋白酶 1:10000 Pepsin 1:10000 室温保存
动力-吲哚-尿素培养基基础(MIU) Motility Indol Urea Medium Base 250g
改良卵磷脂肉汤 用于化妆品微生物检测中样品稀释和增菌。(FDA BAM Chapter 23,ISO 21149:2006,ISO 22718:200... 250g
糖发酵基础肉汤 英文名称:Bromcresol Purple Broth Base 产品规格:250g
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葡萄糖肉浸液肉汤 英文名称:Dextrose Meat Infusion Broth 产品规格:250g
10g 伊红 Y, 溶性 Eosin Y 室温阴凉干燥保存
大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌检验培养基
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DTM添加剂2 英文名称: 产品规格:1ml*5
1瓶 U-2 OS-Luc teT-on细胞株 U-2 OS-Luc teT-on 低温运输和保存
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N-2Supplement(100X),LiquidGibco多少钱布美他尼;丁氧酸(标准品) Bumetanide 295-03-1 质量规格:含量测定
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利卡西平;10,11-二-10-羟基卡马西平 10,11-Dihydro-10-hydroxy Carbamazepine 29331-92-8 质量规格:>98%,美国进口原装
CTAB 代十六三 5g 瓶
Eosin-Methylene Blue Agar 伊红美蓝琼脂EMB 250g 瓶
哈西奈德(标准品) Halcinonide 3093-35-4 质量规格:含量测定
依那普利双酮(标准品) XX 359 质量规格:检查用
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2,4(1H,3H)-Quinazolinedione 亚酰基脲 86-96-4 20mg
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文献和实验N2 supplement的配置和N2 Supplement操作手册
. 注: N-2 Supplement (100X) liquid For the growth and expression of post-mitotic neurons and tumor Cell s of neuronal phenotype. N-2 supplement is a chemically defined, 100X concentrate of Bottenstein's N-2 formulation
Recipes for Tissue Culture Selective Drug Stocks
, aliquot into sterile freezing vials, label with "1000X FIAU", and store @ -20o C. 100X HAT Supplement (hypoxanthine-aminopterin-thymidine): Obtained in 10 ml lyophilized form from GIBCO (cat.# 320-1062AS) and stored @ 4o C
- AT supplement : 50X stock , Sigma A-7422. (Store at -20°C.) - Kanamycin Sulfate: 100X from Gibco-BRL 600-5160AG . (Store aliquots at -20° C) - MCM: Macrophage Conditioned Medium. (used
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