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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
43
- 英文名:
FBS
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ml
产品名称 昆虫SF9细胞专用血清价格
规格: 100ml
别名 昆虫SF9细胞血清
英文名称 FBS
储存条件 -20℃
单位瓶
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
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1个 陶瓷研钵 (直径60 mm) 常温
RS培养基(RS琼脂平板) RS Medium 100g
1 mg Indo-1 AM Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
1瓶 Hipa 1-6 [Hepa1-6]细胞株 Hipa 1-6 [Hepa1-6] 低温运输和保存
100mL 非冻型尿液DNA保存液 Urine DNALOCKER 室温
250次 细菌DNAout Bacterial DNAOUT 常温保存(溶菌酶需要-20℃保存)
48 T 乳酸测试盒(测血清、组织等) Oxidative Stress Detection Kit 常温保存
50T 人白血病融合基因PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
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10次 蛋白质电泳分子量标准 (43-200 KD) Protein Marker -20℃保存
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文献和实验1.为什么要热灭活血清?加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。2.L-谷氨酰胺在细胞培养中重要吗?它在溶液中不稳定吗? L-谷氨酰胺在细胞培养时是重要的。脱掉氨基后,L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中经过一段时间后会降解,但是确切的降解率一直没有最终确定。L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成,而氨
专供固定昆虫虫体用的针。外形与普通的大头针近似,但较细长。顶端的小针帽多用细铜丝镶成,便于手控插入和移动标本,末端细而尖,便于插入虫体,针体由优质不锈钢丝制成。如用一般钢丝制成的,其表面尚涂有黑漆,长期使用可不致生锈。针的粗细长短不同,一般可分为 7种型号: 00、 0、 1、 2、 3、 4和 5号, 00号最小,无针帽,多在双插法时专用,可用来制作体型微小的昆虫标本,将虫用小针插在小软木片或卡片纸上,再用大号针插住软木片或卡片纸。 00号针最细,直径仅 0.3毫米,每增加
。 标本盒 用来保存针插干燥标本。标本盒用木材或硬纸板制成。为了便于存放,标本盒大小有一定规定,其规格为长38.1厘米、宽44.4厘米,高7.5厘米,盒盖上装有玻璃,便于隔盖观察盒内标本。为防止虫害或菌类侵入,盒盖和盒体之间要有凹凸槽口相接,使其尽量密合。盒底铺有软木板,便于插下昆虫针。 标本柜 是保存干燥标本的专用柜。其规格应为双层
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