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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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21
- 英文名：
PI-103
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：PI3K/AktandmTOR抑制剂（PI-103）说明书
英文名称：PI-103
产品规格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
发货周期：1～3天
PI-103是有效地PI3K/AktandmTOR抑制剂，对重组PI3K同工型p110α和mTOR的IC50值分别为2nM和30nM。
注本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！
CAS号371935-74-9
纯度98.93%
分子量348.36
储存条件-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
PI3K/AktandmTOR抑制剂（PI-103）说明书待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
2′-脱胸苷对照品进口/国产Rex1/Zinc finger protein 754 锌指蛋白754抗体进口/国产BTA ELISA Kit 大鼠膀胱肿瘤抗原人抗心脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产2′-脱胸苷-5′-单盐对照品特价供应PIWIL3 piwi样3蛋白抗体进口/国产CD62E(Human E-Selectin) ELISA kit 人E选择小鼠抗心脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产2′-脱胸苷-5′-三盐对照品现货促销VGF/Nerve growth factor inducible 神经生长因子诱导蛋白抗体进口/国产CD25(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD25分子大鼠抗心脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA Kit，48T/96T 进口、国产2′-脱胸苷-5′-三三盐对照品特价促销pan methyl Lysine 泛赖抗体进口/国产CCL1(Human Eotaxin 1) ELISA Kit 人嗜粒细胞趋化蛋白牛的牛血清白蛋白残留检测ELISA Kit，48T/96T 进口、国产
PI3K/AktandmTOR抑制剂（PI-103）说明书50mgCAS号手套 一次性无（腈）防护手套 10盒/箱 中号59-14-3480-23-996T胱天蛋白酶1(CASP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%CD30分子检测试剂盒100mgPM989-38-8高端化学试剂溶质载体家族30成员5(SLC30A5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号手套 一次性无（腈）防护手套 10盒/箱 大号957-75-5482-53-196T酪激酶2(Tyk2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%CD22分子检测试剂盒100mgFL603-45-2高端化学试剂溶质载体家族30成员6(SLC30A6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
15mgCAS号手套 一次性无（腈）防护手套 10盒/箱 大号957-75-5482-53-196T酪激酶2(Tyk2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%CD22分子检测试剂盒100mgFL603-45-2高端化学试剂溶质载体家族30成员6(SLC30A6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)50mgCAS号手套 腈手套 小号957-75-54790-996T脂酰肌醇特异性酯酶Cβ1(PLCβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%CD209分子检测试剂盒20mgBtk523-21-7高端化学试剂肝细胞核子1β(HNF1β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
50mgCAS号手套 腈手套 小号957-75-5479--996T脂酰肌醇特异性酯酶Cβ1(PLCβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%CD209分子检测试剂盒20mgBtk523-21-7高端化学试剂肝细胞核子1β(HNF1β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)50mgCAS号手套 腈手套 大号957-75-5904667-65-896T细胞附着蛋白4(CYTH4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC≥99%CD19分子检测试剂盒250mgWNT3A523-21-7高端化学试剂糖异构酶1(TPI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
50mgCAS号手套 腈手套 大号957-75-5904667-65-896T细胞附着蛋白4(CYTH4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC≥99%CD19分子检测试剂盒250mgWNT3A523-21-7高端化学试剂糖异构酶1(TPI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号一次性腈手套（耐用型，无，麻面，深蓝色） S号1022-79-362394-00-796T干扰素调节子5(IRF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%CD15分子检测试剂盒20mgHIF523-21-7高端化学试剂墨蝶呤还原酶(SPR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
200mgCAS号一次性腈手套（耐用型，无，麻面，深蓝色） S号1022-79-362394-00-796T干扰素调节子5(IRF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%CD15分子检测试剂盒20mgHIF523-21-7高端化学试剂墨蝶呤还原酶(SPR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号一次性腈手套（耐用型，无，麻面，深蓝色） M号1022-79-319013-03-796T细胞附着蛋白相互作用蛋白(CYTIP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC≥98%CD147分子检测试剂盒500mgGL4199-88-6高端化学试剂亮丰富重复FLII相互作用蛋白1(LRRFIP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：PI3K/AktandmTOR抑制剂（PI-103）说明书
英文名称：PI-103
产品规格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
发货周期：1～3天
PI-103是有效地PI3K/AktandmTOR抑制剂，对重组PI3K同工型p110α和mTOR的IC50值分别为2nM和30nM。
注本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！
CAS号371935-74-9
纯度98.93%
分子量348.36
储存条件-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
PI3K/AktandmTOR抑制剂（PI-103）说明书待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
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第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
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50mgCAS号手套 腈手套 大号957-75-5904667-65-896T细胞附着蛋白4(CYTH4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC≥99%CD19分子检测试剂盒250mgWNT3A523-21-7高端化学试剂糖异构酶1(TPI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号一次性腈手套（耐用型，无，麻面，深蓝色） S号1022-79-362394-00-796T干扰素调节子5(IRF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC≥98%CD15分子检测试剂盒20mgHIF523-21-7高端化学试剂墨蝶呤还原酶(SPR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
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一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验相关实验
化锂）：IMPase 抑制剂（即Inositol monophosphatase，肌醇单磷酸酶） 3）Earle's平衡盐溶液：制造饥饿 4）N-Acetyl-D-sphingosine（C2-ceramide）：Class I PI3K Pathway抑制剂 5）Rapamycin：mTOR抑制剂 6）Xestospongin B/C：IP3R阻滞剂 （二）自噬抑制剂 1）3-Methyladenine（3-MA）：（Class III PI3K） hVps
forevercan 想请教下园子里的各位xdjm们一个问题，那就是LY294002：PI3K/AKT阻断剂的问题，LY294002是PI3K通路的阻断剂，他到底是阻断了PI3K的蛋白表达，也就是说使PI3K的蛋白得表达下降了；还是阻断了PI3K蛋白的磷酸化，说明书只是说体外培养的细胞加入该阻断剂后，可以抑制AKT的磷酸化，但是对PI3K的蛋白及其磷酸化PI3K蛋白的改变未提及。请指教。 forevercan 自己顶一下
wangwenhai03 你好，我是临床医学专业的学生，正准备做实验。现在在设计阶段。遇到了我专业知识以外的问题。很焦急，请教这里的大侠 是信号通路抑制剂浓度计算的问题。 1，SB203580是P38-MAPK的抑制剂，分子量是377。说明书上说当IC50为0.3--0.5uM的时候，抑制P38-MAPK磷酸化。那么实验设计里，SB203580抑制P38-MAPK磷酸化的浓度范围是多少？ 2,LY294002是PI3K
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