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- XY-Bioscience
- XY-4142-1
- 中国
- 2025年07月15日
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- 英文名：
AO/PI双染试剂盒
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六个月
- 供应商：
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。
- 规格：
100T
储存条件：
2-8℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。
有效期：六个月。
AO/PI双染试剂盒产品简介：
AO/PI双染细胞凋亡检测试剂盒是采用DNA探针双染细胞核的方法检测细胞的状态。吖啶橙（Acridine Orange，AO）为一种荧光染料，该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核DNA和RNA染色。其激发波长为488nm，吸收波长为515nm。它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，复合物可发出不同颜色的荧光，红色荧光为AO-DNA(F>600nm),绿色荧光为AO-RNA或单链DNA(F>530nm)。因此，在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。Propidium Iodide是一种DNA结合性染料，其激发和发射波长分别为488nm和630nm，产生红色荧光，但无膜通透性，不能透过活细胞膜，只能染死细胞。因此，在荧光显微镜下观察，正常细胞不能着色，早期凋亡细胞呈微弱红光，晚期凋亡细胞红光加强，坏死细胞呈强红色荧光。
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文献和实验示例： Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h，FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后，流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞，Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况，检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法： 1） 选中所有颗粒，将FSC
%），4个样品低轻度污染（低于10%）。 2、AO/PI双染活/死细胞进行自动计数AO和PI是荧光核酸染料，检测细胞的活性。AO是一种细胞膜透过性染料，染总细胞，发绿色荧光;，PI不具有细胞膜通透性，染死细胞，发橙/红色荧光。当死细胞同时包含了AO和PI，发生荧光共振能量转移，AO发散的荧光被PI吸收，因此，只有活细胞才发绿色荧光。此外，成熟的血小板和红细胞是无核的，不能被荧光染料着色，完全排除。AO/PI混合液20ul和白细胞样品20ul，按照1：1的比例混合，通过Cellometer细胞计数仪计数
，一般是高压汞灯光源；其次要选择好模块，不同的染料需要不同的激发波长和阻断波长，使用紫外光源时要将可见光源暂时关闭。 请教可与AO/EB染色法达到同样效果的方法 sxh: 因为EB毒性太强，所以想请教各位有没有其它毒性较小的染料，同样可以区分凋亡与坏死的细胞，或者单用AO可不可以区分，有没有用AO/PI双染的? maokai123: 有一种hochest染料可以替代。单独用ao可以区分凋亡和不凋亡的，aoeb的优点是利用凋亡不同阶段个细胞器对染料通透性差异可以区分每个细胞凋亡的程度是早期还是晚期染
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