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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
41
- 英文名:
VS-5584
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
英文名称:VS-5584
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
发货周期:1~3天
VS-5584是一种泛PI3K/mTOR激酶抑制剂,抑制PI3Kα,PI3KαmtH1047,PI3Kβ,PI3Kδ,PI3Kγ和mTOR,IC50分别为2.6nM,3.3nM,21nM,2.7nM,3nM和3.4nM。
注本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号1246560-33-7
别名SB2343
纯度99.57%
分子量354.41
储存条件-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:1.泛PI3K/mTOR激酶抑制剂(VS-5584) 说明书用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品:
98%25mlT-AOC
98%5mlMDA
97%1gCAT
97%5gGhrelin
99%25gUCP2
99%5gUCP3
99%1gNPY
泛PI3K/mTOR激酶抑制剂(VS-5584) 说明书Lissamine rhodamine B分子式C27H29N2NAO7S2分子量580.65 NK-2R peptide 神经激肽A受体(多肽抗原
性罗丹明B,性红52,二红B,赤色106号,酰罗丹明B NKA(Neurokinin A
丽丝罗丹明B 35202 NKB (Neurokinins B
Lissamine rhodamine B分子式C27H29N2NAO7S2分子量580.65 NKG2A/CD159a/KLRC1 NK细胞受体2A/自然杀伤细胞活化性受体2A抗原
性罗丹明B,性红52,二红B,赤色106号,酰罗丹明B NKG2D(natural killer cell group 2D
丽丝罗丹明B 35202 NKR ; Neurokin B receptor (Neuromedin K receptor; NK-4 receptor
Lissamine rhodamine B分子式C27H29N2NAO7S2分子量580.65 NKR(Neuromedin B Receptor
性罗丹明B,性红52,二红B,赤色106号,酰罗丹明B Nm23(NDP Kinase A,NDPKA
丽丝罗丹明B 35202 Nm23-H1 (nucleoside dIPhosphatase kinase A
Lissamine rhodamine B分子式C27H29N2NAO7S2分子量580.65 Nociceptin 孤菲肽(痛敏肽
性罗丹明B,性红52,二红B,赤色106号,酰罗丹明B Nociceptin receptor 孤菲肽受体(痛敏肽受体
丽丝罗丹明B 35202 Nogo R 轴索过度生长抑制子受体(多肽抗原
Lissamine rhodamine B分子式C27H29N2NAO7S2分子量580.65 Nogo-66 1-40 Nogo-66 (1-40
性罗丹明B,性红52,二红B,赤色106号,酰罗丹明B Nogo-A 轴索过度生长抑制子-A(抗原
丽丝罗丹明B 35202 Nogo-B/A 轴索过度生长抑制子-B/A抗原
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验erik 哪地方有卖的?想买点试试! lin123heng 我已经试用过EDU试剂了,做的是细胞爬片。因为流式要激发光550nm,我们实验室只有488nm。我用的是国产试剂,说明书写的一塌糊涂,最后我不得不自己完全改一个protocol.结果并不是很理想,因为我们照相机红色荧光不是很敏感,图片,没有上面的那么好。如果要我再选一次,我宁愿用PI或者是Brdu做流式。我买的试剂盒是1200元/20次。六孔板做的。 希望有兴趣的战友们实验前先看一看自己实验
forevercan 想请教下园子里的各位xdjm们一个问题,那就是LY294002:PI3K/AKT阻断剂的问题,LY294002是PI3K通路的阻断剂,他到底是阻断了PI3K的蛋白表达,也就是说使PI3K的蛋白得表达下降了;还是阻断了PI3K蛋白的磷酸化,说明书只是说体外培养的细胞加入该阻断剂后,可以抑制AKT的磷酸化,但是对PI3K的蛋白及其磷酸化PI3K蛋白的改变未提及。请指教。 forevercan 自己顶一下
功能缺失,ACS 患者就不能有效代谢氯吡格雷,那么就可能出现氯吡格雷抵抗现象。而这对于 ACS 患者而言,是非常危险的。对于这种现象,FDA 已经在氯吡格雷说明书中给予黑框警告:警示氯吡格雷的疗效取决于其活性代谢物的活性,对于 CYP2C19 弱代谢者,考虑其他 CYP2C19 抑制剂治疗 [4]。遗憾的是,目前已经有大量的研究表明,CYP2C19 基因功能缺失突变在西方国家患者中的携带率为 30%,而亚洲患者的携带率在 50%-60% 之间 [5-8]。虽是漫画,但不是笑话,类似的情况可能正发生你的亲朋
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