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NCG 免疫缺陷小鼠模型

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      江苏集萃药康生物科技股份有限公司

    • 服务名称

      NCG

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      根据客户需求提供

    NCG

    品系名称:NOD/ShiLtJGpt-Prkdc em26I l2rg em26 / Gpt

    品系类型:Knock out

    品系编号:T001475

    背景:NOD/ShiltJGpt

     

    NCG (NOD/ShiltJGpt-Prkdcem26Cd52Il2rgem26Cd22/Gpt)是使用基因编辑技术敲除了NOD/ShiltJGpt小鼠的Prkdc(Protein kinase, DNA activated, catalytic polypeptide)及Il2rg(Common gamma chain receptor)基因而获得的重度免疫缺陷品系。NOD/ShiltJGpt遗传背景使该品系具有天然免疫缺陷,如补体系统、巨噬细胞缺陷,同时,该背景Sirpa与人类CD47具有高亲和力,使NOD/ShiltJGpt比其它品系更适合人源移植物(如:肿瘤和人源细胞)的定植。 Prkdc基因功能缺失导致V(D)J重组不能正常发生,造成T细胞和B细胞不能发育成熟。IL2RG是多种白细胞介素细胞因子受体的共同亚基,IL2RG失活则导致6种不同细胞因子信号通路缺失,造成NK细胞缺陷。因此,NCG是迄今为止免疫系统缺陷最为彻底的小鼠模型之一,非常适合人源肿瘤细胞移植(CDX)、人源肿瘤组织移植(PDX)、人外周血单个核细胞(PBMC)及人源造血干细胞(CD34+ HSC)移植进行免疫重建。NCG生存周期长(>89周),利于长期移植及药效学评价。

     

    应用领域

    1、人源免疫重建小鼠模型,如BLT人源化小鼠、PBMC人源化小鼠及CD34+人源化小鼠;

    2、人源肿瘤细胞、肿瘤组织移植(CDX,PDX);

    3、药效评价(小分子、大分子、联合用药);

    4、人类癌症模型;

    5.、干细胞研究

     
    功能分析
     
    1.NCG 外周血免疫细胞分群统计图

    产品细节图片1

    取 7 周龄 NOD、NOD-Scid 及 NCG 小鼠外周血进行流式检测,测定其免疫细胞分群比例。结果显示,与 NOD 相比,NOD-Scid 几乎没有 T、B 细胞,NK细胞比例代偿性上升,DC 细胞、中性粒细胞、单核细胞及嗜酸性粒细胞比例升高,巨噬细胞比例下降。与 NOD 相比,NCG 几乎没有 T、B、NK 细胞和巨噬细胞,免疫缺陷比 NOD-Scid 更为彻底。
     
    2.NCG 脾脏免疫细胞分群统计图

    产品细节图片2

    取 7 周龄 NOD、NOD-Scid 及 NCG 小鼠脾脏进行流式检测,测定其免疫细胞分群比例。结果显示,与 NOD 相比,NOD-Scid 几乎没有 T、B 细胞,NK 细胞比例代偿性上升,DC 细胞、中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞及巨噬细胞比例升高。与 NOD 相比,NCG 几乎没有 T、B、NK 细胞,免疫缺陷程度更高。

     

    3.NCG 骨髓免疫细胞分群统计图
    产品细节图片3
    取 7 周龄 NOD、NOD-Scid 及 NCG 小鼠骨髓进行流式检测,测定其 B 细胞生成过程中各分群的比例(造血干细胞、Pre-pro-B、Pro-B、Pre-B、Immature B、Transitional B、Early mature B、Late mature B)。结果显示,与 NOD 相 比,NOD-Scid 和 NCG 小鼠骨髓中 Pre-pro B 细胞和 Pro B 细胞增多,而 Pre B 细胞、Early/late mature B 细胞含量降低。此外,与 NOD 和 NOD-Scid 小鼠相比,NCG 小鼠骨髓中 Transitional B 细胞显著增加。
     
    4.NCG 脾脏、胸腺及淋巴结 H&E 染色

    产品细节图片4

    取 7 周龄 NOD、NOD-Scid 及 NCG 小鼠脾脏、胸腺和淋巴结置于 4%PFA 中固定,石蜡包埋,切片,进行 H&E 染色,判定其脏器结构是否存在异常。结果显示,NOD 小鼠脾脏被膜完整,未见增厚。脾窦未见扩张,脾小体大小未见异常变化,红白髓比例大致正常;胸腺被膜完整,皮质与髓质正常,髓质中可见胸腺小体,未见出血、萎缩等病理变化;淋巴结皮质髓质比例正常,淋巴细胞未见减少或坏死。而 NOD-Scid 及 NCG 小鼠脾脏淋巴小结体积减小,淋巴细胞数量减少;胸腺皮质与髓质界限不清,胸腺萎缩,皮质和髓质淋巴细胞显著减少;
    淋巴结皮质与髓质界限不清,皮质萎缩,皮质和髓质淋巴细胞显著减少。H&E 阅片结果与体视及流式结果一致。此外,取 7 周龄 NOD、NOD-Scid 及 NCG 小鼠心脏、肝脏、肺、肾、结肠、睾丸(雄性)进行 H&E 染色。结果显示,三种品系脏器组织结构均正常。
     
    5.NCG 脏器指数及淋巴结个数
    产品细节图片5
     
    取 7 周龄 NOD、NOD-Scid 及 NCG 小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺、肾、脑和睾丸(雄)进行脏器称重,计算脏器指数。结果显示,与 NOD 小鼠相比,NOD-Scid 和 NCG 小鼠脾脏指数显著降低,NCG 减少更加显著。其余脏器指数无显著差异。此外,通过对小鼠颈部淋巴结、腋下淋巴结、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结和派氏淋巴结进行计数,结果显示,与 NOD 小鼠相比,NOD-Scid 和 NCG 小鼠淋巴结数目明显减少,而 NCG 小鼠均无腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结及派氏淋巴结。
     
    6.NCG 生长曲线
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    对于 16 周龄 NCG 小鼠进行体重分析。结果显示,NCG 雄鼠的体重是普遍高于雌鼠的。
     
    产品细节图片7
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    将对数生长期的人乳腺癌细胞系 BT-474、人结肠癌细胞系 COLO 205、人胰腺癌细胞系 PANC1 和人卵巢癌细胞系 SK-OV-3 分别接种至 6-8 周龄的 Nu/NOD-Scid/NCG 小鼠皮下,随着时间肿瘤的大小呈梯度曲线增长。(肿瘤体积数值以 Mean±SEM 表示)。
     
    产品细节图片14
     
    构建 NCG 小鼠皮下移植肺癌 PDX 模型,评价厄洛替尼(Erlotinib)的抗肿瘤作用。结果显示,与模型对照组相比,厄洛替尼治疗组能够显著抑制肿瘤生长。且与阿瓦斯汀(Avastin)联合治疗后,较厄洛替尼单给药组,更能显著抑制肿瘤生长。(肿瘤体积数值以 Mean±SEM 表示)。
     
     
    发表文献
    1. Hu B, Yu M, Ma X, et al. Interferon-a potentiates anti-PD-1 efficacy by remodeling glucose metabolism in the hepatocellular carcinoma microenvironment. Cancer discovery. Apr 12 2022;doi:10.1158/2159-8290.Cd-21-1022(IF:39.397)
    2. Ma W, Yang Y, Zhu J, et al. Biomimetic Nanoerythrosome‐Coated Aptamer‐DNA Tetrahedron/Maytansine Conjugates: pH‐Responsive and Targeted Cytotoxicity for HER2‐positive Breast Cancer. Advanced Materials.2109609.(IF:30.849)
    3. Song H, Liu D, Wang L, et al. Methyltransferase like 7B is a potential therapeutic target for reversing EGFR-TKIs resistance in lung adenocarcinoma. Molecular cancer. Feb 10 2022;21(1):43. (IF:41.444)
    4. Zhang L, Zhu Z, Yan H, et al. Creatine promotes cancer metastasis through activation of Smad2/3. Cell metabolism. 2021;33(6):1111-1123.e4.(IF:22.4)
    5. Liu C, Zou W, Nie D, et al. Loss of PRMT7 reprograms glycine metabolism to selectively eradicate leukemia stem cells in CML. Cell Metab. Apr 26 2022.(IF:22.4)
    6. Zhang X-N, Yang K-D, Chen C, et al. Pericytes augment glioblastoma cell resistance to temozolomide through CCL5-CCR5 paracrine signaling. Cell Research. 2021:1-16. (IF:25.617)
    7. Dai Z, Mu W, Zhao Y, et al. T cells expressing CD5/CD7 bispecific chimeric antigen receptors with fully human heavy-chain-only domains mitigate tumor antigen escape. Signal transduction and targeted therapy. Mar 25 2022;7(1):85.(IF:18.187)
    8. Dai Z, Liu H, Liao J, et al. N7-Methylguanosine tRNA modification enhances oncogenic mRNA translation and promotes intrahepatic cholangiocarcinoma progression. Molecular Cell. 2021. (IF:17.97)
    9. Hao M, Hou S, Li W, et al. Combination of metabolic intervention and T cell therapy enhances solid tumor immunotherapy. Science Translational Medicine. 2020;12(571).(IF:17.956)
    10. Liu Y, Liu G, Wang J, et al. Chimeric STAR receptors using TCR machinery mediate robust responses against solid tumors. Science Translational Medicine. 2021;13(586).(IF:17.956)
    11. Yan H, Wang Z, Sun Y, Hu L, Bu P. Cytoplasmic NEAT1 Suppresses AML Stem Cell Self‐Renewal and Leukemogenesis through Inactivation of Wnt Signaling. Advanced Science. 2021;8(22):2100914. (IF:17.521)
    12. Luo Q, Wu X, Chang W, et al. ARID1A prevents squamous cell carcinoma initiation and chemoresistance by antagonizing pRb/E2F1/c-Myc-mediated cancer stemness. Cell Death & Differentiation. 2020;27(6):1981-1997. (IF:12.067)
    13. Wu M, Zhang X, Zhang W, et al. Cancer stem cell regulated phenotypic plasticity protects metastasized cancer cells from ferroptosis. Nature communications. Mar 16 2022;13(1):1371.(IF:14.919)
    14. Liu H, Bai L, Huang L, et al. Bispecific antibody targeting TROP2xCD3 suppresses tumor growth of triple negative breast cancer. Journal for ImmunoTherapy of Cancer. 2021;9(10):e003468.(IF:12.469)

     

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    2. Ma W, Yang Y, Zhu J, et al. Biomimetic Nanoerythrosome‐Coated Aptamer‐DNA Tetrahedron/Maytansine Conjugates: pH‐Responsive and Targeted Cytotoxicity for HER2‐positive Breast Cancer. Advanced Materials.2109609.(IF:30.849)
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    4. Zhang L, Zhu Z, Yan H, et al. Creatine promotes cancer metastasis through activation of Smad2/3. Cell metabolism. 2021;33(6):1111-1123.e4.(IF:22.4)
    5. Liu C, Zou W, Nie D, et al. Loss of PRMT7 reprograms glycine metabolism to selectively eradicate leukemia stem cells in CML. Cell Metab. Apr 26 2022.(IF:22.4)
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    8. Dai Z, Liu H, Liao J, et al. N7-Methylguanosine tRNA modification enhances oncogenic mRNA translation and promotes intrahepatic cholangiocarcinoma progression. Molecular Cell. 2021. (IF:17.97)
    9. Hao M, Hou S, Li W, et al. Combination of metabolic intervention and T cell therapy enhances solid tumor immunotherapy. Science Translational Medicine. 2020;12(571).(IF:17.956)
    10. Liu Y, Liu G, Wang J, et al. Chimeric STAR receptors using TCR machinery mediate robust responses against solid tumors. Science Translational Medicine. 2021;13(586).(IF:17.956)
    11. Yan H, Wang Z, Sun Y, Hu L, Bu P. Cytoplasmic NEAT1 Suppresses AML Stem Cell Self‐Renewal and Leukemogenesis through Inactivation of Wnt Signaling. Advanced Science. 2021;8(22):2100914. (IF:17.521)
    12. Luo Q, Wu X, Chang W, et al. ARID1A prevents squamous cell carcinoma initiation and chemoresistance by antagonizing pRb/E2F1/c-Myc-mediated cancer stemness. Cell Death & Differentiation. 2020;27(6):1981-1997. (IF:12.067)
    13. Wu M, Zhang X, Zhang W, et al. Cancer stem cell regulated phenotypic plasticity protects metastasized cancer cells from ferroptosis. Nature communications. Mar 16 2022;13(1):1371.(IF:14.919)
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