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- 文献和实验
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- 规格:
96次
碧云天的Human FSL-1 ELISA Kit (Human Follistatin-like 1 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人卵泡抑制素样蛋白1酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的FSL-1的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为0.31ng/ml,与人Agrin、
Follistatin (315)、FSTL4、FSTL5等均没有交叉反应,与小鼠的FSL-1有11.7%的交叉反应性,板内、板间变异系数均小于10%。
卵泡抑制素样蛋白(follistatin-like 1, FSL-1或FLTL-1),又被称为FRP (follistatin-related protein)、Flik (follistatin-like)或
TSC-36 (TGF-beta1-stimulated clone 36),是一种分子量在45-55kDa之间的分泌型糖蛋白,属于BM-40/SPARC/Osteonectin家族。人FSL-1的cDNA编码产生308个氨基酸的前体蛋白,其中包括20个氨基酸的信号肽。成熟的人FSL-1与小鼠、大鼠、牛和马的FSL-1分别具有94%、95%、98%和99%的氨基酸同源性。体外,FSL-1能够直接与BMP-4相互作用,在体内,FSL-1参与调节正常肺发育过程中BMP-4的信号传递。FSL-1是类风湿性关节炎常见的自身抗原。FSL-1能够通过促进炎性细胞因子分泌诱导炎症产生,或者通过抑制基质金属蛋白酶和前列腺素表达阻止自身免疫性关节炎发生。在肌肉和心脏组织中,FSL-1能够保护内皮细胞功能,通过诱导蛋白激酶AKT1的表达和激活促进局部缺血后的血管再生。FSL-1具有一定的肿瘤抑制作用,在多种肿瘤中FSL-1的表达都会出现下调,在体外,FSL-1能够增加FAS依赖性肿瘤细胞的凋亡。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人FSL-1的浓度,其原理见图1。人FSL-1特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的人FSL-1会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人FSL-1抗体后,生物素化抗人FSL-1抗体与人FSL-1结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人FSL-1浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中人FSL-1浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| PF322-1 | 人FSL-1抗体预包被板 | 8孔×12条 |
| PF322-2 | 样品分析缓冲液 | 5ml |
| PF322-3 | 标准品稀释液 | 10ml |
| PF322-4 | 人FSL-1标准品 | 2-4瓶 |
| PF322-5 | 人FSL-1生物素化抗体 | 10ml |
| PF322-6 | 辣根过氧化物酶标记Streptavidin | 10ml |
| PF322-7 | 洗涤液(20X) | 30ml |
| PF322-8 | TMB溶液 | 10ml |
| PF322-9 | 终止液 | 5ml |
| PF322-10 | 封板膜(透明) | 2张 |
| PF322-11 | 封板膜(白色) | 2张 |
| - | 说明书 | 1份 |
标准品4℃保存,1-2周内有效,-20℃保存6个月内有效;试剂盒其它组份4℃保存6个月内有效。除标准品外,试剂盒其它组份严禁冻存。
注意事项:
由于标准品一般是冻干粉,在制备后需要严格校准,所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶,如果发现有结晶,请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性,标准品配制使用后,如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属,否则容易失效。
加样时,请注意每个样品或标准品必须更换枪头,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试,所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分,即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时,请独立使用各个试剂盒中的试剂,请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要,在加液后请轻轻晃动整个96孔板,以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行,要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要,洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔,以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验Warnings And Limitations This product is for research use only. Not intended for any animal or human therapeutic or diagnostic use unless otherwise stated. Follow appropriate laboratory guidelines. This product contains 0.02% sodium azide
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