Human CA15-3 ELISA Kit

碧云天的Human CA15-3 ELISA Kit (Human Carbohydrate Antigen 15-3 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人糖抗原15-3酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中CA15-3的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为0.38U/ml，与小鼠CA15-3、大鼠CA15-3、马CA15-3、狗CA15-3、猫CA15-3等均没有交叉反应。板内、板间变异系数均小于10%。
糖抗原15-3 (Carbohydrate antigen 15-3,CA15-3)是黏蛋白1 (Mucin-1,MUC-1)在血液中的游离形式，目前作为乳腺癌检测的血清标志物被广泛使用。MUC-1是一种跨膜糖蛋白，通常以异质二聚体形式存在。其胞外域N端链具有超过1000个氨基酸残基，其中具有20个氨基酸的串联重复片段，能够发生O连接的糖基化修饰；MUC1-C包括58个氨基酸的胞外域、28个氨基酸的跨膜域以及72个氨基酸的胞质域，能够与MUC1-N通过非共价键相连形成复合物。MUC1-N端会发生脱落，称为CA15-3，在乳腺癌中其血清浓度会明显上升。MUC1-C的胞质域能够与多种激酶受体相互作用，从而对下游信号通路进行调节。MUC-1几乎在所有的上皮细胞表达，在结肠癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌和胰腺癌中表达升高。
CA15-3主要在肿瘤诊断和判断预后方面具有一定临床意义。CA15-3是第一个发现并且现在仍在使用的乳腺癌相关血清标志物。CA15-3水平升高往往预示着患者处于癌症晚期、肿瘤体积增大，并伴有淋巴结或其它部位的转移发生。但在用于乳腺癌的早期诊断时，CA15-3敏感性较低，仅有15-35%，因此更多的是用于患者预后监测。目前常用的CA15-3单克隆抗体主要有两种：115D8和DF3。
      本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人CA15-3的浓度，其原理见图1。人CA15-3特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人CA15-3会与捕获抗体结合。当加入辣根过氧化物酶标记人CA15-3抗体后，辣根过氧化物酶标记人CA15-3抗体与人CA15-3结合，形成夹心的免疫复合物。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人CA15-3浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人CA15-3浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PC108-1	人CA15-3抗体预包被板	8孔×12条
PC108-2	标准品稀释液	10ml
PC108-3	人CA15-3标准品	2-4瓶
PC108-4	辣根过氧化物酶标记人CA15-3抗体	10ml
PC108-5	洗涤液(20X)	30ml
PC108-6	TMB溶液	10ml
PC108-7	终止液	5ml
PC108-8	封板膜(透明)	2张
PC108-9	封板膜(白色)	2张
-	说明书	1份

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。