Human TREM 1 ELISA Kit

碧云天的Human TREM-1 ELISA Kit (Human Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells-1 Enzyme-Linked 
ImmunoSorbent Assay Kit)，即人髓系细胞触发受体-1酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的TREM-1的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为24.5pg/ml，与人BDNF、Cardiotropin-1
、CD4、CD40、CNTF、Epo、Leptin、LIF、MIF等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
髓系细胞触发受体蛋白(Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells, TREM)属于免疫调剂受体家族，在免疫细胞中表达广泛。TREM蛋白属于I型跨膜受体，包含一个免疫球蛋白可变区域。TREM在跨膜区还含有一个带电荷的赖氨酸残基，通过这个赖氨酸残基，TREM能够与免疫受体酪氨酸激活基序(Immunoreceptor Tyrosine based Activation Motifs, ITAM)包含的跨膜蛋白DAP12相互作用，引发细胞内活化。
成熟的人TREM-1分子量为30kDa，包含184个氨基酸的胞外域、29个氨基酸的跨膜区和5个氨基酸的胞质域。TREM-1主要表达在中性粒细胞、单核细胞和多种巨噬细胞亚型上。当受到革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌感染时，膜绑定的TREM-1表达会增多。在体液中同样也能检测到游离TREM-1的存在。
TREM-1是固有免疫的重要调节因子，同时在机体受到感染时还能放大炎症反应。在Toll样受体的配体同时存在时，利用激动性抗体刺激单核细胞表面TREM-1能够有效增加促炎性趋化因子和细胞因子的产生，减少抗炎性因子IL-10的产生。单核细胞TREM-1的激活同样还会诱导初始单核细胞分化为未成熟的树突状细胞。TREM-1配体和TLR配体同时作用时会诱导中性粒细胞脱粒、呼吸爆发和吞噬作用。游离TREM-1的产生与否能够用来区分败血症和非感染性炎症。另外在小鼠模型中，封闭TREM-1能够阻止感染性休克的发生，这提示TREM-1也许是治疗败血症的潜在靶点。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人TREM-1的浓度，其原理见图1。人TREM-1特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人TREM-1会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人TREM-1抗体后，生物素化抗人TREM-1抗体与人TREM-1结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人TREM-1浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人TREM-1浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PT910-1	人TREM-1抗体预包被板	8孔×12条
PT910-2	样品分析缓冲液	5ml
PT910-3	标准品稀释液	10ml
PT910-4	人TREM-1标准品	2-4瓶
PT910-5	人TREM-1生物素化抗体	10ml
PT910-6	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PT910-7	洗涤液(20X)	30ml
PT910-8	TMB溶液	10ml
PT910-9	终止液	5ml
PT910-10	封板膜(透明)	2张
PT910-11	封板膜(白色)	2张
-	说明书	1份

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。