Human IL-36beta ELISA Kit

碧云天的Human IL-36β ELISA Kit (Human Interleukin 36β Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人白细胞介素36β酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-36β的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为9.6pg/ml，与人IL-36α、IL-36γ，小鼠IL-36β等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
白细胞介素36β (Interleukin 36β,IL-36β)，又被称为IL-1F8和IL-1H2，是IL-1家族中的一员。IL-1家族中还包括IL-1α、IL-1β、IL-1Ra、IL-18、IL-36Ra/IL-1F5、IL-36α/IL-1F6、IL-37/IL-1F7、IL-36γ/IL-1F9和IL-1F10。人IL-36β具有157个氨基酸残基，不具有信号肽。由于C端70个氨基酸的不同存在两种亚型：IL-36β1和IL-36β2。IL-36β1缺少IL-1家族保守的4个β折叠结构。人IL-36β2与小鼠、犬、牛和马相应的IL-36亚型分别具有62%、67%、63%和59%的同源性。
IL-36β主要表达在角质细胞、CD4+T细胞、神经元细胞和神经胶质细胞中。当发生炎症反应刺激以及在出现牛皮癣损伤时，角质细胞和滑液成纤维细胞所表达的IL-36β会出现上调。IL-36β能够通过活化树突状细胞和T细胞增强机体炎症应答。还能够促进多种细胞因子、趋化因子和抗菌肽的产生。IL-36β通过与受体复合物结合发挥生物学功能，该受体复合物包含两部分：IL-1 Rrp2和IL-1 RAcP。IL-36 Ra同样也能与IL-1 Rrp2结合，从而发挥拮抗作用。当N端的四个氨基酸分子被酶切除去后，IL-36β活性会有所增强。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人IL-36β的浓度，其原理见图1。人IL-36β特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人IL-36β会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人IL-36β抗体后，生物素化抗人IL-36β抗体与人IL-36β结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人IL-36β浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人IL-36β浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PI638-1	人IL-36β抗体预包被板	8孔×12条
PI638-2	样品分析缓冲液	5ml
PI638-3	标准品稀释液	10ml
PI638-4	人IL-36β标准品	2-4瓶
PI638-5	人IL-36β生物素化抗体	10ml
PI638-6	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PI638-7	洗涤液(20X)	30ml
PI638-8	TMB溶液	10ml
PI638-9	终止液	5ml
PI638-10	封板膜(透明)	2张
PI638-11	封板膜(白色)	2张
-	说明书	1份

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。