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Human CXCL14 E
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碧云天的Human CXCL14 ELISA Kit (Human CXC Chemokine Ligand 14 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人趋化因子14酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的CXCL14的ELISA试剂盒。本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为46.5pg/ml,与人MCP-1、MCP-2、MCP-3、MCP-4、 RANTES,小鼠Eotaxin等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。趋化因子(Chemokines)是一组结构上类似,平均分子量在8到12kDa之间的蛋白质。通过与G蛋白偶联受体相互作用,参与调节多种白细胞细胞间相互作用。其结构中具有4个半胱氨酸残基,两两之间通过二硫键连接,通过两组半胱氨酸残基所处位置不同将趋化因子家族分为两类:CC趋化因子,即两组二硫键相连的半胱氨酸残基彼此相邻;CXC趋化因子,即两组二硫键相连的半胱氨酸残基间由一个氨基酸隔开。在肿瘤微环境中,趋化因子的表达决定了免疫细胞的分布,从而调控了肿瘤部位的免疫应答,在调节肿瘤发展和转移中发挥重要作用。趋化因子14 (CXC Chemokine Ligand 14, CXCL14),又称BRAK (Breast and Kidney Expressed Chemokine),属于non-ELR (Glu-Leu-Arg) CXC趋化因子亚族,几乎在所有上皮细胞中都有表达。CXCL14前体蛋白包含99个氨基酸,经酶切作用除去22个氨基酸的信号肽后得到77个氨基酸的成熟CXCL14。人和小鼠CXCL14在氨基酸序列上仅有两个氨基酸残基不同,不同种属间CXCL14的氨基酸组成具有高度的保守性。CXCL14所参与的生理过程主要有单核细胞来源的巨噬细胞的募集和成熟以及皮肤中朗格汉斯细胞的再生;CXCL14还能促进成熟的自然杀伤细胞到达炎症部位。在高脂饮食的肥胖小鼠中,CXCL14还能诱导巨噬细胞浸润白色脂肪组织。CXCL14也可以抑制血管生成,对B细胞、单核细胞、树突状细胞和成熟的自然杀伤细胞都有趋化作用。在头颈部鳞状细胞癌、乳腺癌、肺癌和肝癌中CXCL14均展现出了一定的肿瘤抑制效果。本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人CXCL14的浓度,其原理见图1。人CXCL14特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的人CXCL14会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人CXCL14抗体后,生物素化抗人CXCL14抗体与人CXCL14结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人CXCL14浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中人CXCL14浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。包装清单:
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