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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
43
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
3×10ml|3×20ml
1．中性粒细胞碱性磷酸酶染色液(NAP)说明书用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称：中性粒细胞碱性磷酸酶染色液(NAP)说明书英文名称：
产品规格：3×10ml|3×20ml
发货周期：1～3天
用途
专门用于血液或骨髓细胞涂片的中性粒细胞的碱性磷酸酶染色，又称同时偶联法。
注意事项
碱性磷酸酶活性部位呈蓝色，位于胞桨中。油镜下计数101个中性粒细胞，求出百分比和积分。非特异性反应少，结果可靠。
储存条件4℃，避光，6个月
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品：
2,5-二酰11-Oxo-mogroside V
环氧Atractyloside A
2,4,6-三(-)-Epicatechin gallate
N-苄氧羰-L-Acetate gossypol
3-烯-2-醇Vinorelbine Tartrate
L-化乳清Hypocrellin B
甘胆水合物Anisic aldehyde
D-化乳清Zingerone
3-溴-2-Vanillic acid
3,3'-二二砜Vanillin
中性粒细胞碱性磷酸酶染色液(NAP)说明书正 BUTYRIC ACID(SG)度≥98% AEG-1 peptide AEG-1抗原
正酞 BUTYLPHTHALIDE, 3-n-(P)度≥98%Ag-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein
正酞 BUTYLPHTHALIDE, 3-n-(P)度95%AGER(Advanced glycosylation end product-specific receptor
正醇 BUTYL ALCOHOL(SG)度≥98% AGEs 晚期糖化终末产物AGEs
正 Butylamine >99.0%(GC&T)度≥95% AGEs control article(advanced glycosylation end products control article
正 Butylamine >99.0%(GC&T)度≥98% Aggrecan 软骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原
长春质 CATHARANTHINE(RG)度≥97% Agrin peptide 聚集蛋白抗原
樟脑 CAMPHOR, (+/-)-(SG)度≥98% Agtr1/AT1a(Angiotensin II receptor, type 1a
酰化白藜芦;Acetyltrans CAS号 42206940 规格 20mg 订购|咨询
羊藿次苷II;Icarisid II CAS号 113558159 规格 20mg 订购|咨询
茵芋苷;Skimmin CAS号 93390 规格 20mg 订购|咨询
亚油;Methyl Linolea CAS号 112630 规格 100mg 订购|咨询
油;Methyl Oleate CAS号 112629 规格 100mg 订购|咨询
硬脂;Methyl SteaCAS号 112618 规格 50mg 订购|咨询
酰蒲公英萜;Taraxeryl ac CAS号 2189802 规格 20mg 订购|咨询
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文献和实验人中性粒细胞激活肽-2(NAP-2)ELISA试剂盒 说明书
上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人中性粒细胞激活肽-2 (NAP-2)ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 NAP-2 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 NAP-2与单抗结合，加入生物素化的抗人 NAP
细胞原代培养时经常使用，胶原酶作用的对象是胶原组织，因此不容易对细胞产生损伤。胶原酶的使用浓度为0.1-0.3mg/L或200000U/L,作用的最佳pH为6.5。胶原酶不受Ca2+、Mg2+及血清的抑制，配制时可用PBS。 三、pH调整液:常用的有HEPES液和NaHCO3溶液。 1.NaHCO3溶液：NaHCO3是培养基中必须添加的成分，一般情况下按说明书的要求准确添加，以保证培养基在5%CO2的环境下pH达到设计标准。如果是封闭式培养，即不与5%CO2的环境发生交换达到平衡
），请先用样品稀释液稀释一定倍数（ n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（ ×n ×5 ）。 5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6． 底物请避光保存。 7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准 . 8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9． 本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
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