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- 2025年07月12日
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- 文献和实验
- 技术资料
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35
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100T
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒价格
英文名称：
产品规格：100T
发货周期：1～3天
用途
流式细胞术检测细胞凋亡与细胞坏死
注意事项
Hoechst33258能被活细胞摄取，与DNA结合，在紫外线下呈蓝色荧光。PI使死细胞着色产生红色荧光。在散点图上结果为正常细胞呈低蓝/红光，凋亡细胞呈高蓝/低红光，坏死细胞呈低蓝/高红光。
储存条件-20℃，避光，12个月
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Lenvatinib (E7080)Chikungunya IgG
Z-Ile-IleChikungunya IgM Elisa
Semagacestat (LY450139)Chlamydia IgM (pneumoniae)
CladribineChlamydia (psittaci/trachomatis) Ab (cats only)
Formoterol HemifumarateChlamydia Ag Rapid Test (cassette) (min 10 kits)
SMI-4aChlamydia IgA (pneumoniae)
AfatinibChlamydia IgA (trachomatis)
Chlamydia IgG (pneumoniae)
MacitentanChlamydia IgG (trachomatis)
Vandetanib (ZD6474)Chlamydia IgM (pneumoniae)
Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒价格胡椒(标准品)英文名(EN)Methyl laurate,≥98%特价促销 规格(SP)100G
胡萝卜苷(标准品)英文名(EN)Ethyl methyl sulfonate,特价促销 规格(SP)5G
胡麻属苷（标准品）英文名(EN)Ethyl methacrylate,特价促销 规格(SP)100ML
葫芦巴（标准品）英文名(EN)Ethyl acetoacetate,≥特价促销 规格(SP)100G
葫芦巴盐盐（标准品）英文名(EN)Methyl acetoacetate,≥特价促销 规格(SP)500G
葫芦素B(标准品)英文名(EN)NωNitroLarginine特价促销 规格(SP)1G
葫芦素D;葫芦苦素D英文名(EN)Methyl gallate,98%特价促销 规格(SP)50G
葫芦素E（标准品）英文名(EN)Propyl gallate,≥98%特价促销 规格(SP)100G
槲皮苷(标准品）英文名(EN)Dimethyl oxalate,≥特价促销 规格(SP)50G
槲皮素 英文名(EN)Dimethyl carbonate,≥特价促销 规格(SP)100ML
槲皮素(标准品）英文名(EN)Diethyl carbonate,≥特价促销 规格(SP)100ML
槲皮素O葡萄糖7O鼠李糖苷(标准品)英文名(EN)Dimethyl malonate,98%特价促销 规格(SP)100G
槲皮素7O葡萄糖苷(标准品)英文名(EN)Diethyl malonate,≥98%特价促销 规格(SP)100G
糊精;白糊精英文名(EN)Dimethyl succinate,98%特价促销 规格(SP)100G
糊精肽，英文名(EN)Dimethyl succinate,98%特价促销 规格(SP)100G
虎掌草皂甙D（标准品）英文名(EN)Diethyl succinate,≥特价促销 规格(SP)100G
虎杖甙/虎杖苷/白藜芦苷英文名(EN)Diethyl adipate,特价促销 规格(SP)100G
虎杖甙/虎杖苷/白藜芦苷(标准品)英文名(EN)Bis(2ethylhexyl)adipate,≥特价促销 规格(SP)100G
操作步骤(仅供参考)：
1、Hoechst33342/PI细胞凋亡染色试剂盒价格贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
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储存条件-20℃，避光，12个月
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
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第一种：
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一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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葫芦素E（标准品）英文名(EN)Propyl gallate,≥98%特价促销 规格(SP)100G
槲皮苷(标准品）英文名(EN)Dimethyl oxalate,≥特价促销 规格(SP)50G
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2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验相关实验
膜的改变是这些特征中较早出现的一种。在凋亡细胞中，细胞膜磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的外侧。Annexin-V是一种35－36 KD的钙粒子依赖的磷脂结合蛋白，它对PS具有较高的亲和力。细胞凋亡时，可以和外翻的PS结合，从而可以检测凋亡的细胞。发生坏死的细胞其细胞膜上的PS也外翻，因而也会阳性。因此，常用的凋亡试剂盒除了采用Annexin-V标记之外，还会加一种DNA染料，常用的有PI和7－AAD，由于坏死的细胞膜通透性增高，染料可以进入细胞内和DNA结合，从而可以发荧光，区分出坏死
, PS）正常位于细胞膜的内侧，但在细胞凋亡的早期，PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中(图3)。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力特异性结合。将Annexin-V进行荧光素（FITC、PE）或biotin标记，以标记了的Annexin-V作为荧光探针，利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(propidine iodide, PI)是一种核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但在凋亡中晚期的细胞和死细胞
凋亡检测试剂盒产品名称：Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒英文名称：Annexin V-FITC & PI Apoptosis Detection Kit产品分类：细胞凋亡检测试剂盒[Apoptosis Assay Kit]产品编号：A0001c检验方法：Apoptosis包 装：20T产品说明：Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒 概述产品说明在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧，细胞发生凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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