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- 西格
- XG-J3665
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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
41
- 英文名：
EnterobacteragglomeransEwingandFife
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
2-8℃冷藏
- 规格：
详见说明书
一)定期移植保藏法
即传代培养保藏法，包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。是指将菌种接种于适宜的培养基中，最适条件下培养，待生长充分后，于4℃－6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。
二)液体石蜡保藏法
也叫矿物油保藏法,是指将菌种接种在适宜的斜面培养基上，最适条件下培养至菌种长出健壮菌落后注入灭菌的液体石蜡，使其覆盖整个斜面，再直立放置于4℃－15℃进行保存。
三)沙土管保藏法
亦称载体保藏法，具体方法是将培养好的微生物细胞或孢子用无菌水制成悬浮液,注入灭菌的沙土管中混合均匀，或直接将成熟孢子刮下接种于灭菌的沙土管中，使微生物细胞或孢子吸附在载体上，将管中水分抽干后熔封管口或置干燥器中于4℃－15℃进行保存。
资源名称 成团肠杆菌说明书
种属 EnterobacteragglomeransEwingandFife
安全等级 1
模式菌株 no
培养方法
培养基 2
生长条件 37℃
保藏方法与步骤：
一)培养基制备
1.准备器皿，如三角瓶、试管、培养皿、烧杯、吸管等，根据不同情况洗涤、干燥、包装、灭菌。
2.溶解培养基配料：先在烧杯中放适量水，按培养基配方称取各项材料，依次将缓冲化合物、主要元素、微量元素、维生素等材料加入水中溶解，最后加足水量。
3.调pH值；
4.加凝固剂，如琼脂、明胶等。将凝固剂加入液体培养基中，加热并不断搅拌至融解，再补足所蒸发水分。
5.过滤分装；
6.包扎标记；
7.灭菌；
8.无菌检查。
二)接种
1.斜面接种
根据菌种的不同性征，可选择不同的方法，如点接、中央划线、稀波状蜿蜒划线法、密波状蜿蜒划线法、挖块接种法等；
2.穿刺接种
用直接种针从原菌种斜面上挑取少量菌苔，从柱状培养基中心自上而下刺入，直到接近管底（勿穿到管底），然后沿原穿刺途径慢慢抽出接种针。适用于细菌和酵母菌等。
3.液体接种
挑取少量固体斜面菌种或用无菌滴管等吸取原菌液接种于新鲜液体培养基中。
三)培养
将接种后的培养基放入培养箱中，在适宜的条件下培养至细胞稳定期或得到成熟孢子。
四)保藏
1.保藏温度和时间：4℃－6℃保存，根据要求每 3－6 个月移植一次。对于某些菌种，如芽裂酵母，阿舒假囊酵母，棉病囊霉等，须 1－3 个月移植一次。
2.保藏湿度 ：用相对湿度表示，通常为 50%－70%。测量仪表采用毛发湿度计或干湿球湿度计。
五)移植培养
将培养物转接到另一新鲜培养基中，再在适宜条件下培养。
六)复壮
菌种如有退化，应将退化的菌种引入原来的生活环境中令其生长繁殖，通过纯种分离，在宿主体内生长等方法进行复壮。
注意事项：
1、成团肠杆菌说明书微生物菌种应保藏在干燥低温和清洁之处，在室温环境内的放置时间不宜过长。
2、应在无菌环境下进行操作，以防止杂菌污染。
3、斜面菌种保存时间通常为3-6个月，冻干菌种保藏时间通常为2-15年。
6-Aminouracil 873-83-6 中文名：6-氨基尿嘧啶 分子式：C4H5N3O2 度：98.0% 小鼠损伤分子1(Kim-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
6-Aminoquinoxaline 6298-37-9 中文名：6-氨基喹喔啉 分子式：C8H7N3 度：98.0% 小鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
6-Aminopenicillanic acid 551-16-6 中文名：6-氨基青霉烷酸 分子式：C8H12N2O3S 度：98.0% 小鼠抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISAKit ELISA. 96T/48T
6-Aminonicotinic acid 3167-49-5 中文名：6-氨基烟酸 分子式：C6H6N2O2 度：98.0% 小鼠纤连蛋白(FN)ELISAKit ELISA. 96T/48T
6-Aminoindole 5318-27-4 中文名：6-氨基吲哚 分子式：C8H8N2 度：98.0% 小鼠FMS样酪酸激酶3(Flt3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
RIN-m5f(大鼠胰岛β细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2ALKALINEPHOSPHATASE,2-COMPONENTSYSTEMS碱性嶙酸酶(含酶及稀释液)生物技术级COLDsigma
F9(小鼠畸胎瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0290MDA-MB-468(人癌细胞)5×106cells/瓶×2 犬肾细胞系/IgR;MDCK/IgR顺,顺-1,5-环忻二1 ≥98.0% (GC) 1,5-CYCLOOCTcDIqNq 122-1-1
615小鼠树突状细胞肉瘤瘤株;DCS溴醋酯;溴醋醋酯 Mqthyl broMoccqtctq 96-3-
CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 氧化金500毫升RT
CM-M033小鼠肝实质细胞完全培养基100mLropanol; Propanol; Alcohol C3;
角质细胞生长添加物KGS(S)-(-)-5'-苄氧基苯基卡维地洛(S)-(-)-5'-Benzyloxyphenyl Carvedilol质量规格：美国进口
CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人细胞裂解液 (阳性对照) (R)-(+)-O-去甲卡维地洛(R)-(+)-O-Desmethyl Carvedilol质量规格：美国进口
大鼠气管上皮细胞完全培养基 100mL5-甲基吲哚(>98%,BR)5-Methylindole质量规格：>98%,BR
CRFK细胞，猫肾细胞 SK-HEP-1(人肝癌细胞) 猕猴肺细胞;MML25-硝基愈创木酚(植物激素级)5-Nitroguaiacol质量规格：>98%,植物激素级
NRG1 Protein Canine 重组狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 标签)6-溴-2-萘酚(>98%,BR)6-Bromo-2-naphthol质量规格：>98%,BR
成团肠杆菌说明书兔间变表皮鳞癌瘤株;VX21丙基-β-D-吡喃半乳糖苷ALLYL-BETA-D-GALACTOPYRANOSIDE质量规格：>98%,BR
人前列腺上皮细胞(HPEpiC)(5×105)2-氨基环乙醇2-Aminocyclohexanol 质量规格：>98%,日本原装进口
CL-0131KB(人口腔表皮样癌细胞)5×106cells/瓶×2Y-27632.2HClY27632质量规格：>98%,ROCK1(p160ROCK) 选择性抑制剂
人非小细胞肺癌细胞;NCI-H23 大鼠视网膜muller细胞 100mL灵芝酸A(标准品)Ganoderic acid A质量规格：HPLC≥95%，标准品
A549/DDP 肺腺癌/顺铂耐药株蝙蝠葛苏林碱(标准品)Daurisoline质量规格：≥96%，标准品
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文献和实验凋亡或产生细胞碎片，容易误认为是细菌污染；另外培养基中的杂质纤维也容易误认为是霉菌污染，具体区分方法如下：1.细胞碎片和杆菌细胞碎片只会随着细胞状态的变差而变多，通常增长不快；杆菌则增殖非常快，以常见的大肠杆菌为例，常温25℃增殖1倍需要40min左右（此数据可查阅相关文献验证），培养基很快变黄且浑浊。2.凋亡细胞和球菌凋亡细胞通常只比正常细胞小一点，只会随着细胞状态的变差而变多，通常增长不快；球菌则要小很多，且成串或成团，培养基很快变黄且浑浊。3.杂质纤维和霉菌杂质纤维通常是过滤时残留的滤纸
7 的缓冲液来洗脱；洗脱液提前预热至 65℃ 也可以提高洗脱效率。 3. 提取质粒转化大肠杆菌效率低 大肠杆菌转化效率受到多种因素的影响，例如感受态细胞状态，转化方式及操作（电转或热激），质粒用量，质粒质量等等。从感受态角度优化，可以考虑感受态本身的状态，比如贮存时间、贮存方式不当会导致感受态转化效率明显降低，此外热激条件也会影响感受态转化效率，建议热激时间严格按照感受态类型或说明书操作。从质粒角度优化，可以进一步确认质粒用量，质粒浓度，质粒是否降解等。 4. 提取质粒转染细胞效率低
1. 琼脂糖凝胶电泳检测质粒为何有三条条带 通常完整的质粒电泳会看到多个电泳条带，这与质粒的多种形态有关。质粒可以有超螺旋，线性，开环等多种不同的形态，所以在电泳时常看到三条不同大小的条带，而最下面最亮的条带一般为超螺旋条带。 左图为电镜下的质粒形态，可以看到质粒有不同程度的超螺旋形态；右图为质粒电泳图 2. 质粒纯度不好 质粒中常见的污染杂质有蛋白质、基因组 DNA、RNA、乙醇等。这些杂质有可能是质粒提取过程中操作不当有关，比如： ①在加入裂解缓冲液后，剧烈震荡导致大肠杆菌基因
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