游离脂肪酸测定试剂盒(比色法)规格

游离脂肪酸测定试剂盒(比色法)规格

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  • 邦景
  • BJ-15625
  • 进口、国产
  • 2025年07月11日
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      51

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      详见说明书

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      详见说明书

    • 供应商

      上海邦景

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      50管/48样

    培养操作:
    1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
    2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
    3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
    4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
    1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
    2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
    3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.

    游离脂肪酸测定试剂盒(比色法)规格
    产品名称:游离脂肪酸测定试剂盒(比色法)规格
    英文名称:Nonesterified Free fatty acids assay kit

    产品规格:50/48
    发货周期:13
    检测指标:游离脂肪酸;NEFA
    本试剂盒可测各种动物血清、血浆、组织等样本中游离脂肪酸的含量。游离脂肪酸,别名非酯化脂肪酸,是脂肪水解产物,测定血清脂肪酸可以了解脂肪代谢的情况,升高代表脂肪分解增加。游离脂肪酸能与铜离子结合形成脂肪酸的铜盐而溶于氯仿中,其含量与游离脂肪酸含量成正比。用铜试剂测定其中铜离子的含量,即可推算出游离脂肪酸的含量。
    使用方法:
    1. 悬浮细胞,2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎,造成假阳性,过短,细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶消化液,加入细胞培养液终止消化,2000rpm离心5min收集细胞。
    2. 4℃预冷PBS,洗涤细胞2次(2000rpm x 5min),收集细胞2~5×105 。
    3. 离心弃上清,加入500μL结合缓冲液,轻轻吹打重悬细胞。
    4. 加入5μL Annexin V-FITC,轻轻吹打混匀,加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许,可以在检测前5分钟加入PI)
    5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
    注意事项:
    游离脂肪酸测定试剂盒(比色法)规格尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
          如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
          染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
          如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
          荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
          用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
          需自备PBS。
          本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
          为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
    细胞培养的优点:
    1.研究的对象是活细胞
    在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
    2.研究条件可以人为控制
    pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
    3.研究的样本可以达到比较均一性
    通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
    4.研究内容便于观察、检测和记录
    采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
    Limaprost 5 mg)     11alpha。,SdihydroxyS20dimethyl9oxoprosta2EEdien1oic acidα20dimethylΔ2Prostaglandin E1|α20dimethylΔ2PGE1Limaprost

    Misonidazole 50 mg)     NSC 261037|Ro 70582|SR αmethoxymethyl2nitro1Himidazole1ethanol
    两性霉素B5GM)     Amphotericin B CAS 9MW 4.08≥800ug/mgUSP
    Abacavir sulfate) (50 mg)     4[2amino6cyclopropylamino9Hpurin9yl]1S4R2cyclopentene1methanol sulfateAbacavir sulfate
    SC560 Assay Reagent 1 ea)     SC560 Assay Reagent
    2Butyl3benzofuranyl4[2diethylaminoethoxy]35diiodophenyl ketone hydrochloride     Amiodarone Hydrochloride
    5′CTP2Na5胞嘧啶核苷三嶙酸二钠盐5BR90%
    (2脱氧D核糖)
    Esculinsesquihydrate马栗树皮苷1AR98%
    克罗米通 CrotcMiton 3636
    8羟基shēng huà shì jì容量:RT250毫升
    (3S)13磺酰基72酮盐酸盐,英文名或英文缩写:TLCK,级别:BR%,规格:1
    2553化丙啶Propidium iodide
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    双歧双歧杆菌 模式菌株 /
    KorserCitrateSodiumBroth
    RV肉汤(EP) 250g 用于沙门氏菌选择性增菌培养。
    细胞生物学研究有以下几个方面。
    细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
    ①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
    ②生物膜与细胞器的研究。
    ③细胞骨架体系的研究。
    ④细胞增殖及其调控。
    ⑤细胞分化及其调控。
    ⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
    ⑦细胞的起源与进化。
    ⑧细胞工程。

     

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