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42
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详见说明书
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详见说明书
- 供应商:
上海邦景
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低温冷藏
- 规格:
5mL|10mL|100mL|500mL
产品名称:10×多聚赖氨酸溶液说明
英文名称:10X Poly-L-Lysine Solution
产品规格:5mL|10mL|100mL|500mL
发货周期:1~3天
储存条件:冷冻(-20℃)避光
概述
多聚赖氨酸溶液是广泛应用的组织切片与载玻片黏合剂,该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。
特点
使用方便,防脱片效果好。
应用
适用于组织学、免疫组织化学、细胞涂片和原位杂交等实验使用的载玻片的防脱片处理,以防实验操作过程中组织脱片。
注意事项:
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
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L赖酸乙酯100克
Peptone 500g原装 OXOID
去氧胆酸钠,英文名或英文缩写:Deoxycholic acid wo7ium salt,级别:AR,98.5%,规格:1公斤
联本 Biphqnyl;1,1′Biphqnyl;Phqnylbqnzqnq;Bibqnzqnq 2009/2/4
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A.C.E.SEQUENCINGBUFFER1XA.C.E. 测序缓冲液 (1X)测序级100MLRT
55230,2,4本三羧1,2,4Benzenetricarboxylic anhydride
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嶙酸三乙酯shēng huà shì jì容量:2~8℃,避光25克
反式4氧基肉桂醋异忻酯 4MqTHOXYCINNcMIC cCID 2qTHYLHqXYL qSTqR 8397
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小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA试剂盒 ,英文名: 1,3-βD-Glu ELISA Kit
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人AT丰富结合域1A(ARID1A)免疫试剂盒 Human ARID1A ELISA Kit
英文名称MouseIerleukin-6ELISAKIT小鼠白介素6(IL-6)规格:96T/48T
冰冻切片制片预处理脱水液100毫升
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10×多聚赖氨酸溶液说明人白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
兔子可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)免疫试剂盒 Rabbit soluble Vascular cell adhesion molecule 1,sVCAM-1 ELISA Kit
神经调节蛋白3(G3)ELISA试剂盒 ,英文名: G3 ELISA Kit
PorcineInsulin,INSELISA试剂盒猪胰岛素(INS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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文献和实验涂片,原位杂交等使用的玻片的防脱片处理,以防实验操作过程中组织掉片。也可用于细胞培养,增加细胞贴壁能力。 [使用说明] 免疫学 操作步骤(可直接在玻片上涂布) 1. 灭菌的ddH2O 1:10稀释该多聚赖氨酸溶液。 2. 用之前将稀释的多聚赖氨酸溶液放在室内,使其温度到室温18-26℃ 3. 将玻片浸在稀释的多聚赖氨酸溶液5分钟。注意增加时间不会提高包被效果。 4.在60℃烘箱1小时干燥,或室温18-26℃过夜干燥待用。 [注意] 1. 每100mL已稀释的多聚赖氨酸溶液
分钟(阻滞非特异性染色); 12、弃去血清,滴加一抗(PBS 液稀释一抗、说明书推荐 1:50-1:500,故取浓度 1:200),置湿盒内 37℃ 孵育 1 小时; 13、PBS 液冲洗,3 分钟×3; 14、滴加 1 滴(50?l)第二抗体,室温下孵育 10 分钟; 15、PBS 冲洗,3 分钟×3; 16、滴加 1 滴(50 ul)链霉菌抗生物素—过氧化物酶溶液,室温下孵育 10 分钟; 17、PBS 冲洗,3 分钟×3; 18、滴加 2 滴(100?l)新鲜
说明:这是我今年做免疫组化的一点体会,奉献给大家。如有不正确的地方,敬请指教。同时,这也是我应付《免疫组化》的一份作业,老师给了我85分。斑竹呀,如果觉得有点用,就请鼓励一下,加点分吧!:D:D:D应用SABC法进行免疫组化染色的体会SABC(Strept Actividin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法。由于该方法中的链霉亲和素的等电点接近中性(pH=6.0-6.5),对组织和细胞的吸附性特别低,因而具有较低的背景。它的步骤
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