相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
21
- 英文名:
Luminescent Cell Viability Assay Kit
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100次|500次
英文名称:Luminescent Cell Viability Assay Kit
产品规格:100次|500次
发货周期:1~3天
本试剂盒是一种通过化学发光法测定细胞内ATP含量从而来定量检测活细胞数目的试剂盒。本试剂盒的性能和用途与Promega公司的同类产品基本相同,对于相同的细胞样品本试剂盒的发光效果更强一些。
本试剂盒比常见的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它细胞活力测定方法更加简单快捷。只需把试剂盒提供的检测试剂与培养细胞等体积混合,反应10分钟后即可进行化学发光检测。无需洗涤细胞,也无需更换或去除培养液。并且化学发光非常稳定,在反应开始后的10分钟内无显著变化,30分钟内的下降不超过10%。
本试剂盒不仅适合少量样品的检测,也非常适合大量样品的高通量筛选检测。
本试剂盒线性范围广,检测灵敏度高。用96孔板进行检测时,本试剂盒在0-50,000个细胞/孔的细胞密度范围内有良好的检测效果,并且在仅有几百个细胞时仍有良好的线性关系。当细胞数量仅为50个/孔时,发光强度可达空白孔的5倍左右。
ATP,作为最重要的能量分子,在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP是细胞新陈代谢的一个重要指标,也是具有代谢活性细胞的重要标志性分子,并和活细胞数目成良好的线性关系。因此,ATP含量能很好地反应活细胞的数目,即本试剂盒可以通过测定ATP含量来进行细胞计数或检测细胞活力。
本试剂盒通过ATP检测细胞活力的原理参考下图。借助ATP依赖的萤光素酶催化的萤光素发光反应,ATP可以通过测定化学发光来进行定量。由于ATP含量能很好地反映活细胞的数目,而ATP含量和发光强度成正比,这样就可以简单地通过化学发光强度来计算出细胞活力或细胞数目。
细胞活力检测试剂盒(化学发光法)检测ATP的原理图
对于96孔板,我们推荐使用100μl细胞培养液和100μl的检测试剂,总体积为200μl,此时本试剂盒可以进行100次检测。对于384孔板,我们推荐使用25μl细胞培养液和25μl的检测试剂,总体积为50μl,此时本试剂盒可以进行400次检测。也可以用其它体积的试剂进行检测,但细胞培养液和检测试剂体积的比例必须为11。
储存条件室温,有效期2年。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:1.细胞活力检测试剂盒(化学发光法)价格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品:
2--3-三氟基-5-硝基吡啶银丝/银/Silver
6--2-酮银片/银/Silver
1-基环己基碳酸酯银/银粉/Silver
4-氧羰基-3-氧酸铝箔/铝/Aluminum
N-基-D-脯氨醇酒石酸铜/葡萄酸铜/二羟基琥珀酸铜/2,3-二羟基琥珀酸铜/Cupric tartrate trihydrate
2-基-3-溴苯酸酯柠檬酸铜/枸橼酸铜/Cupric citrate
4-溴-2-酸酯酸铜/一水醋酸铜/Cupric acetate monohydrate
2-溴-6-酸酯焦酸钠/Sodium pyrosulfate
3-溴-4-氧酸氟铝酸钠/冰晶石/氟铝化钠/六氟铝酸钠/铝钠/铝氟酸钠/Sodium fluoroaluminate
2-基-5-苯酸酯草酸钠/二酸钠/草酸二钠盐/Sodium oxalate
细胞活力检测试剂盒(化学发光法)价格β-Dextranase葡聚糖酶1克BR,4000BAEEu/mg,大豆
β-Cyclodextrin环麦芽七糖500U超,99%
β-caroteneβ-叶红素250毫克IND
β-Amylase1,4-α-D-葡聚糖麦芽水解酶5克BR,4000u/g
β-Alanine methyl ester hydrochloride3-基酯盐盐10克BR,
β-Alanine ethyl ester HC1β-酯盐盐5克BR,99%
β-Alanine3-基10克BR,
α-Napthyl acetate-1-酯1克超,
α-Naphtholbenzeinα-纳富妥25毫克ACS
α-Naphthoflavone7,8-并黄250毫克CP,99%
α-Methyl-L-DOPA3-羟基-α-基-L-酪水合物250毫克BR,99%
α-Lactalbumin白蛋白1克BR,50u/mg
α-Ketoglutaric acid disodium salt2-二25克BR,99%
α-Ketoglutaric acid2-二5克BR,
α-Ionone位紫罗兰1公斤CP,99%
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
Antigen Retrieval : for immunohistochemistry (Mike A. Dyer) Dissociated Cell Staining : immunohistochemistry (Mike A. Dyer) 相关链接: 仪器库 >> 显微系统 >> 倒置显微镜 仪器库 >> 影像系统 >>专业影像系统 试剂库 >> 免疫检测 >>ELISA检测试剂盒 抗体库 >> 抗体 抗体
素能及时有效地满足糖尿病患者的临床需要,有助于进一步对检测试剂盒的研制。【关键词】胰岛素 化学发光免疫测定法(CLIA) 糖尿病分类号: R58 [著者标引] 文献标识码:A 文章编号:1009-4822(2006)03-0262-03
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









