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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
21
- 英文名:
EED226
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称:胚胎外胚层发育(EED)抑制剂(EED226) 价格
英文名称:EED226
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
EED226是高效选择性的胚胎外胚层发育(EED)抑制剂,IC50值为22nM。
注本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
CAS号2083627-02-3
纯度98.70%
分子量369.4
储存条件-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
操作步骤(仅供参考):
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
胚胎外胚层发育(EED)抑制剂(EED226) 价格待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
75%5gAMS
≥98%5MGCMCase
97%1mlPP
95%100gFBP
95%25gG6PC
≥98.0%(GC)25mlPEPCK1
7-8%,体:250mlPEPCK2
胚胎外胚层发育(EED)抑制剂(EED226) 价格麸酞,麸,3,3-双(4-羟)(3H)-异并呋 STAT6(signal transducers and activators of transduction 6
Selectfluor® 试剂 1406815 Streptavidin, SA 链霉亲和素
Selectfluor® fluorinating reagent分子式C7H14B2CLF9N2分子量354.26 Streptococcus suis 2 (Cell protein
选择性试剂,N--N'-()三二双(四盐),1--,4-二双环2.2.2辛二(四)盐 streptomycin/BSA 链偶联牛血清白蛋白
Selectfluor® 试剂 1406815 streptomycin/OVA 链偶联鸡卵白蛋白
Selectfluor® fluorinating reagent分子式C7H14B2CLF9N2分子量354.26 streptomycin/OVA 链偶联血蓝蛋白
选择性试剂,N--N'-()三二双(四盐),1--,4-二双环2.2.2辛二(四)盐 Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1
Selectfluor® 试剂 1406815 SUMO 类泛素蛋白
Selectfluor® fluorinating reagent分子式C7H14B2CLF9N2分子量354.26 Survivin 细胞凋亡抑制子的一种(抗原
选择性试剂,N--N'-()三二双(四盐),1--,4-二双环2.2.2辛二(四)盐 sVEGFR2 可溶性血管内皮生长子受体2
Tergitol? TMN 表面活性剂 608288 SYK (Spleen tyrosine kinase
Tergitol? TMN分子式分子量 SYVN1(synovial apoptosis inhibitor 1
润湿剂,α,5-二-(2-)己-@-羟聚(代,2-二),聚二醇三壬,三壬醇聚烯 T Beta10 peptide 胸腺素β10抗原
盐化四砷 1233348 T4-BSA 状腺素T4偶联牛血清白蛋白
Tetraphenylarsonium chloride,hydrochloride分子式C24H20ASCL·HCL·XH2O;(C6H5)4ASCL·HCL·XH2O分子量455.25 (as Anhydrous) T7 tag(recombinant T7-tagged proteins
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验4月6日,国际著名学术期刊《血液》在线发表了中国科学院上海生命科学研究院/上海交通大学医学院健康科学研究所发育与疾病实验室及瑞金医院医学基因组学国家重点实验室的最新研究发现:进化上高度保守的PTEN-C/EBPa-CTNNA1信号轴控制造血干细胞发育与白血病干细胞恶性转化。 该实验室前期研究表明CTNNA1基因(编码alpha-catenin蛋白)在正常造血干细胞表达,但在伴有5号染色体长臂缺失的骨髓增生异常综合症和急性髓系白血病患者的白血病干细胞(或白血病起始细胞)中表达水平显著降低
2,EED和SUZ12的PRC2蛋白复合体,介导组蛋白H3在第27位赖氨酸残基的三甲基化修饰(H3K27me3)和转录抑制。与此相反,高的p42/p30比例则导致p42C/EBPa结合到CTNNA1基因的近端启动子元件,通过促进H3K4三甲基化(H3K4me3)修饰激活CTNNA1转录。进一步研究发现,在PTEN敲除的小鼠骨髓和Pten敲低的斑马鱼胚胎中,野生型C/EBPa和alpha-catenin蛋白水平均显著下调,同时伴有造血干祖细胞的白血病样增生和异常浸润。更重要的是,该研究发现临床上约20%
.aau9263Science:揭示哺乳动物卵母细胞中的非中心体纺锤体组装机制哺乳动物胚胎经常异常发育,从而导致流产和遗传性疾病,如唐氏综合症。胚胎发育异常的主要原因是卵子减数分裂过程中的染色体分离错误。与体细胞和雄性生殖细胞不同的是,卵子通过一种缺乏中心体的特化微管纺锤体分离染色体。典型的中心体由一对被中心粒周围材料包围的中心粒组成,并且是中心体纺锤体(centrosomal spindle)的主要微管组织中心。人们对哺乳动物卵子中的非中心体纺锤体(acentrosomal spindle)是如何组装
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