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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
42
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
200mg
使用方法:
1. 悬浮细胞，2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎，造成假阳性，过短，细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶消化液，加入细胞培养液终止消化，2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS，洗涤细胞2次（2000rpm x 5min）,收集细胞2～5×105 。
3. 离心弃上清，加入500μL结合缓冲液，轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC，轻轻吹打混匀，加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许，可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
细胞生物学研究有以下几个方面。
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称：L-NAME(eNOS抑制剂)说明
英文名称：L-NAME
产品规格：200mg
化学式：C7H15N5O4.HCl
分子量：269.69
CAS：51298-62-5
储存：-20℃，有效期12个月
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
气单胞菌培养基基础50张/盒
Urea 250g/500g/1kg/5kg 原装 Sigma U0631
酚番红花红shēng huà shì jì容量：500u
4安基派啶 4cminopipqridinq 0321
对胺shēng huà shì jì容量：100克
琼脂糖凝胶2B1000U
(示蛋白胨)
4(基甲基)本酸盐酸盐，英文名或英文缩写：metxyl 4(aminometxyl)benzoate xy7nochloride，级别：BR，1M四氢溶液，规格：25克
5基1H本并三坐 5Mqthyl1Hbqnzotriczolq 26
粘蛋白胭脂红shēng huà shì jì容量：5KU
GENEPAGEPLUS5%6MUREA*CLDPAK*5% GENE PAGE PLUS, 6 M尿素生物技术级500MLCOLD
80433过氧化二异丙本;过氧化二枯茗;二枯茗过氧;icuMyl peroxide;Bis(α,αdiMe thylbenzyl) peroxide;Bis(1metxyl1pxenyletxyl)peroxide;Di(α,αdimetxylbenzyl)peroxide;CuMyl peroxide
DSerinemetxylesterxy7nochlorideD丝酸盐酸盐25克BR，98%
没食子蓝 Gallo,90% 622 1G 通用试剂
固红ITR盐(+4℃) FcST RqD ScLT ITR 801
人胆道癌组织源细胞培养试剂盒 人胆道癌组织源细胞培养试剂盒 试剂盒
人癌组织源细胞培养试剂盒 人癌组织源细胞培养试剂盒 试剂盒
人膀胱癌组织源细胞培养试剂盒 人膀胱癌组织源细胞培养试剂盒 试剂盒
人甲状腺癌组织源细胞培养试剂盒 人甲状腺癌组织源细胞培养试剂盒 试剂盒
L-NAME(eNOS抑制剂)说明中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA
人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293);APP-PS1
CSNK1G1 Others Human 人 CSNK1G1 / CKI-gamma 1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
RKO细胞，结肠腺癌细胞 人鼻咽癌细胞系,SUME-a细胞 CL-0371K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨细胞)5×106cells/瓶×2
UM-UC-3, 人膀胱移行细胞癌
IL34 Others Mouse 小鼠 IL
培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
注意事项：
L-NAME(eNOS抑制剂)说明尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验【求助】使用eNOS的抑制剂L-NAME后对eNOS的磷酸化有影响吗？
cwqq2003 请问大家使用eNOS的抑制剂L-NAME后对eNOS的磷酸化有影响吗？ freecell 以前的研究结果： http://www.actaps.com.cn/qikan/cpaper/zhaiyao.asp?bsid=599454 jempoo Circulation. 2002 Mar 26;105(12):1497-502.
transcription. A 50 mM (5 mg/454 µl) solution of JNK Inhibitor II (Cat. No. 420128) in DMSO is also available. Calbiochem的说明书。此抑制剂对3型JNK均有抑制作用，IC50有所区别。宣称对JNK的抑制比对ERK1和p38等的抑制要强300多倍。可是，这个应该是有争议的。作为JNK抑制剂起效快，但是特异性还有待研究。 提高特异性的另外一个选择是TAT JBD
zuoliping 急切求助：因为有在文献查到PIK3/AKT与我要做的一个蛋白的表达有关，我想做这个通路的抑制剂与这个蛋白的表达的关系，看是否有时间和剂量的依赖性。但是抑制剂的说明说对这个剂量的范围很大，有查文献，在不同细胞中取的浓度组都不太一样，我想知道这些不同的浓度组是怎么确定的呢？要做MTT吗？希望大家不吝赐教！不甚感激！ happytears 当然要做多次预实验了，做之前你需要大量阅读文献，看别人做过的你这种
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