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- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存：
46
- 英文名：
详见说明书
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100管/96样
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：超氧阴离子测试盒(微量法)规格
英文名称：详见说明书
产品规格：100管/96样
发货周期：1～3天
发货周期：1～3天
测定意义:
生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用，但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用，导致机体细胞和组织代谢异常，从而引起多种疾病。
测定原理：
超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2－，NO2－在对酸和α－萘胺的作用下，生成红色的偶氮化合物，在530nm处有特征吸收峰，根据A530值可以计算样品中O2－含量。
自备实验用品及仪器：
天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、氯仿和蒸馏水。
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
超氧阴离子测试盒(微量法)规格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
Haemophilus influenzae流感嗜血杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒HPLC≥98%α2抗纤溶酶检测试剂盒10mgC9
Haemophilus paragallinarum副鸡嗜血杆菌PCR试剂盒HPLC≥98%α2巨球蛋白检测试剂盒20mgOXA
Haemophilus paragallinarum副鸡嗜血杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒分析标准品α2-HS糖蛋白检测试剂盒250mgHPV
Haemophilus paragallinarum副鸡嗜血杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒分析标准品,99%α1微球蛋白/bikunin前体检测试剂盒250mgCO
Haemophilus parahemolyticus副溶血嗜血杆菌PCR试剂盒HPLC≥98%α1酸性糖蛋白检测试剂盒20mgTPS
Perylene规格：>98.0%(GC)99%α1抗胰糜蛋白酶检测试剂盒5mlHPV-IgG48T/96TELISAKitforSarcosynapsin(SRYP)马肉汤
Peroxidase,Horseradish(HRP)规格：BR,RZ>2.5,活性>250U/mg48T/96TELISAKitforShisaHomolog5(SHISA5)肉肝胃消化干粉培养
Perospironehydrochloride规格：>98%,BR48T/96TELISAKitforSecernin2(SCRN2)链球培养
Permutit规格：TechGrade48T/96TELISAKitforSecernin3(SCRN3)仔副培养
Permethrin(isomers)solution规格：分析标准品48T/96TELISAKitforSemaphorin3G(SEMA3G)酵母蛋白胨培养
超氧阴离子测试盒(微量法)规格Thioredoxin-1基氯化镁
Porphyromonasgingivalis antibody己化镁
Leishmaniasis IgM Antibody异基氯化镁
Leishmania spp IgM Ab基氯化镁
Leishimaria IgG antibody叔基氯化镁
Nitro reductase4-氧基基溴化镁
Caveolin 1基溴化镁
Caveolin4-氯基溴化镁
adenylate kinase基氯化镁
deacetylation仲基氯化镁
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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文献和实验光素，是海肾荧光素酶（Rluc）的作用底物，具有许多用途。可用于检测活细胞中钙离子浓度，基因报告分析，BRET（生物发光共振 能量转移）研究，ELISA，HTS，组织或细胞中超氧阴离子和过亚硝酸盐的化学发光检测，在460-470nm之间发射荧光。分子式：C26H21N3O3 分子量: 423.48 g/mol ，纯度：95% ，保存：-15°C避光，保存在惰性气体下。 腔肠素400a/ Coelenterazine 400a: 是BRET研究中海肾荧光素酶（Rluc）的首选底物，此腔肠素衍生
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球蛋白占据红血球的表面，而影响血球的特异性凝集。 材料与试剂 1 ．红血球 2 ．反应板 分聚苯乙烯塑料板和有机玻璃板（聚甲基丙烯酸甲酯），每板又有 96 孔和 72 孔两种规格。按孔型又可分为 V 和 U 型两种， V 型具有更典型的凝集模型， U 型有时比 V 型的血清效价高 1 ～ 2 孔。反应板不能煮沸消毒和浸泡于来苏儿水中。消毒可用 0.5 ％甲醛溶液， 1 ％新洁尔灭及紫外
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