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57
- 英文名:
详见说明书
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详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100T
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:组织活性氧(ROS)检测试剂盒(O12)规格
英文名称:详见说明书
产品规格:100T
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天
活性氧(Reactive oxygen species,ROS) 包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
组织活性氧检测试剂盒是一种利用新型荧光探针O12进行组织活性氧检测的试剂盒。本试剂盒中的O12 ROS探针为绿色荧光的活性氧探针,具有488/520nm的最大激发/发射波长。
O12 ROS探针在组织中活性氧存在的条件下,被氧化生成绿色荧光物质,绿色荧光强度与组织内活性氧水平成正比,检测O12产物的荧光就可以知道组织内活性氧的水平。
O系列活性氧探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针,我公司还可以提供红色荧光的活性氧检测试剂盒。
在激发波长488 nm,发射波长520 nm附近,使用荧光分光光度计、荧光酶标仪、等检测O12产物荧光,从而测定组织内活性氧水平。
我公司还可以为您提供各种细胞样本、冰冻切片样本的活性氧、活性氮等各种颜色的检测试剂盒产品。
本试剂盒可以用于各种动物和植物样本的检测。本试剂盒提供了活性氧阳性对照试剂,以便于活性氧的检测。
本试剂盒只可以用于新鲜组织样本的活性氧检测,不可以用于冻存的组织样本的活性氧检测。
以每个组织样本50mg计,本试剂盒小包装可以染色100个样本。
我公司还可以为您提供各种细胞样本、冰冻切片样本的活性氧、活性氮等各种颜色的检测试剂盒产品。
储存条件:匀浆液2-8℃保存;探针-20℃避光保存;阳性对照-20℃保存。
有效期:一年。
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Egg Drop Syndrome Virus-1976(EDSV-76)鸡减蛋综合征病毒-1976染料法荧光定量PCR试剂盒IsulinZAR1半乳糖凝集素9抗体
Egg Drop Syndrome Virus-1976(EDSV-76)鸡减蛋综合征病毒-1976探针法荧光定量PCR试剂盒APC(Activated protein C)ZNF471富含亮氨酸蛋白LRP130抗体
Egtved Virus艾特韦病毒RT-PCR试剂盒ApelinZDHHC21蛋白转运抑制剂GBF1抗体
Egtved Virus艾特韦病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒Apelin receptor/APJ receptor ZBTB1高尔基体膜蛋白GP73抗体
Egtved Virus艾特韦病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒APG4B/AUTL1ZNF420葡萄糖转运蛋白1抗体
PrasugrelHydrochloride规格:美国进口SIPA1英文名称CD70GTP结合蛋白REM1抗体
Prasugrel规格:≥99.0%,BRSTK40英文名称TCTN3酸化糖原合酶激酶-3α抗体
Praseodymiumstandard规格:1000μg/mlSCG10英文名称TCR alpha生长分化因子7抗体
Praseodymiumstandard规格:1000µg/mL,基体:10%HClS100A4英文名称THEMIS葡萄糖激酶调节蛋白抗体
Pranoprofen规格:>97%,BRPranoprofen规格:HPLC>97%,标准品STARD5英文名称Trim22γ谷氨酰半胱氨酸合成酶抗体(γ-GCSc)
组织活性氧(ROS)检测试剂盒(O12)规格TSH alpha subunit3,3'-二硝基二二...
Der p IgG44,4'-二硝基二二...
Rab-11A2,2'-二二二...
Vascular Endothelial cell Growth Factor1654,4'-二二二...
soluble vascular endothelial growth factor4,4'-二氯二二硫醚
Cytc3,3'-二羟基二二...
c-fos4,4'-二氧基二...
citrullinated antithrombin苄基基硫醚
Human protein-arginine deiminase type-4氯基硫醚
Desmogleins 3 IgG环基硫醚
操作步骤(仅供参考):
1、组织活性氧(ROS)检测试剂盒(O12)规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验resonance(EPR,电子顺磁共振谱)Detection of ROS(活性氧类物质/活性氧)by election paramagnetic resonance(EPR,电子顺磁共振谱)(胰腺组织的ROS生成)。(2) ; ;DCF法: dichlorofluorescein (DCF)二氯荧光黄[1,8,13]活性氧检测试剂盒是利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使
活性氧检测试剂盒(Reactive oxygen species assay kit)是一种利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。 本试剂盒提供了活性氧阳性对照试剂Rosup以便于活性氧的检测。Rosup是一种混合
1、现在做肿瘤细胞内ROS水平测定,使用流式细胞仪测DCF荧光强度,应该用什么做对照呢?就是这种肿瘤细胞的正常细胞做对照吗?可不可以用任意的正常组织细胞做对照呢?或者只用PBS加DCFH-DA作为空白对照呢? 据经验,DCFH-DA本身没有荧光,可穿过细胞膜进入细胞,在胞内转化生成DCFH。在活性氧作用下,DCFH被氧化生成荧光物质DCF,荧光强度与细胞内活性氧水平成正比。你是要测定细胞内活性氧水平,做的是流式细胞检测。建议你设立2组
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