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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
46
- 英文名：
Lipase assay kit
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
50管/48样
英文名称：Lipase assay kit
产品规格：50管/48样
发货周期：1～3天
发货周期：1～3天
检测指标：脂肪酶;LPS
本试剂盒可测各种动物血清（浆）、组织、细胞、培养液等样本中脂肪酶活性。人体脂肪酶主要来源于胰腺。血清LPS得到增高常见于急性胰腺炎及胰腺癌，偶见于慢性胰腺炎。急性胰腺炎时血清淀粉酶增高时间较短，而血清LPS的升高可持续10-15天。腮腺炎时，LPS通常在正常范围，因而LPS对急性胰腺炎的研究更具有特异性。脂肪酶基本组成单位仅为氨基酸，通常只有一条多肽链。它的催化活性仅仅决定于它的蛋白质结构。脂肪酶是分解脂肪的酶，测定血清脂肪酶主要用于对急性胰腺炎的研究。甘油三脂和水制成的乳胶，因其胶束对入射光的吸收及散射而具有乳浊性状。底物在脂肪酶作用下发生水解，使胶束分裂，散射光或浊度因而减低，减低的速率与脂及酶活力有关。
产品优点如下：
1、快速简便：速率法，20分钟可完成20-40例样本的测定。
2、取样量微：取样量仅为50l左右
6、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
3、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
4、再现性好：变异系数CV=1.7%。
5、回收试验： X =102%。
6、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
7、测试面广：可测各种动物血清（浆）、组织等。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：
1．脂肪酶测定试剂盒(比色法)说明书用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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脂肪酶测定试剂盒(比色法)说明书Endothelin 2二香豆素
Endothelin 1氧基白屈菜红
Endothelin麦角甾苷
Endocrine gland vascular endothelial growth factor告达亭苷元
EndoCAb澳洲茄胺
endotoxin肉豆蔻木脂素
brain natriuretic peptide1,7-二羟基-3,4-二氧基山-7-O-葡萄糖苷
enkephalin野百合
CYT Ab刺五加叶中
terminal complement complex C5b-9吴茱萸内酯
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验、稳定性等性能会优于科研试剂盒。 Q2：试剂盒能否分次使用？没有用完的试剂组分如何存放？ A2：试剂盒可以分次使用。我们的酶标板条是可拆卸的，您可以根据实验需求，确定每次实验所需的酶标板条数量及各试剂组分含量。 溶解后的标准品，建议以最高浓度/母液，分装保存于 -20℃ 条件下，避免反复冻融，半个月内使用有效。 生物素化抗体工作液及 HRP 酶结合物工作液需现配现用。未用完的浓缩液及其他组分，需要按照说明书要求，分别及时地保存于 2~8℃/-20℃ 条件下，一般可存放 6 个月。 样本 Q1
licanming 请问有无人用过assaydesigns公司的PKC Kinase Activity Assay Kit（cat NO:EKS-420A）?可否说一下应用的经验？注意事项等？还有，该试剂盒的说明书有几处地方不是很懂，请大家帮忙看一下： 1、To avoid cross contamination, change disposable pipette tips between the addition of each standard
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技术资料暂无技术资料 索取技术资料
