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- 2025年07月08日
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56
- 英文名：
DAPI Staining Solution
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详见说明书
- 供应商：
上海研生
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低温冷藏
- 规格：
10ml|50ml
英文名称：DAPI Staining Solution
产品规格：10ml|50ml
发货周期：1～3天
本品是经过精心优化几乎适用于所有常见细胞和组织细胞核染色的染色液。本DAPI染色液可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。
DAPI是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和溴化乙锭相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。
DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。
DAPI的最大激发波长为340nm，最大发射波长为488nm；DAPI和双链DNA结合后，最大激发波长为364nm，最大发射波长为454nm。
CAS28718-90-3
英文名称dihydrochloride
分子式C16H15N5·2HCl
分子量350.25
储存条件-20℃避光，有效期一年
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：1．DAPI染色液规格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品：
3-氧基烷盐酸盐三偏磷酸钠/磷酸三间酯/Trisodium trimetaphosphate
柴胡总皂苷偏磷酸钠/二缩原偏磷酸钠/Sodium metaphosphate
(+)-3-蒈烯偏硼酸钠/四水合偏硼酸钠/Sodium metaborate tetrahydrate
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1-基-3-基化咪唑嗡磷酸二钠七水物/七水合磷酸二钠/七水合二盐基磷酸钠/七水合磷酸二钠/SSodium phosphate dibasic heptahydrate
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DAPI染色液规格脑血管平滑肌细胞cDNA 规格20mg Human Oncostatin M，OSM ELISA KIT
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少突胶质前体细胞(悬浮生长)cDNA 规格20mg Human Insulin-like growth factor 2, IGF-II ELISA Kit
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星形胶质细胞cDNA 规格20mg Human Insulin ELISA Kit
小脑星形胶质细胞cDNA 规格20mg Human nitric oxide synthase ELISA KIT
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验染色液，染色5分钟。也宜用摇床，或手动晃动。 D. 用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟。 E. 将切片置于载玻片上，滴一滴抗淬灭封片液，盖上一洁净的盖玻片，尽量避免气泡。 F. 荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。激发波长在350nm左右，发射波长在460nm左右， Hoechst 33258的吸收光谱和发射光谱，左侧峰为吸收光谱，右侧峰为发射光谱。 DAPI染核 原理： 主要结合dsDNA；结合小沟的AT。DAPI也结合RNA，但其发射峰波长（500nm
碎片，从制核结果来看，研究者获得了40000个DAPI+核（总回收体积67-70μl），可用于后续单细胞核测序实验。 基于10x Genomics平台的细胞核捕获及数据分析结果，测序数据基本饱和的情况下，Mean Reads per Nucleus在43000左右，mapping率＞73%，杨树茎组织的2个重复显示了表达基因之间的高度共性。 杨树组织细胞核制备注意事项 1、细胞核分离开始前，需将实验中所用的所有溶液、无菌刀片、各个规格的离心管、移液管等所需工具放置于0-4℃预冷至少30分钟
在无血清细胞培养条件下将人 iPS 细胞体外分化为结肠类器官
类器官的孔中移除Blocking Buffer。避免P-200移液管头吸入类器官。 通过添加5 µg/mL DAPI (D9542) 在1X PBS（每份样品300-500 µL）中准备核染色。 为每个样品添加DAPI染色液，在室温下孵育15-20分钟。 用1X PBS (D8537)清洗3次，每次10-15分钟。 样品已准备好在共聚焦显微镜上成像。 材料 References 1.Sato T, Stange DE, Ferrante M, Vries RG, van Es JH
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