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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
22
- 英文名:
Hexokinase assay kit
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
详见说明书
1、己糖激酶测定试剂盒(测红细胞)(紫外比色法)说明书贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的 完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:己糖激酶测定试剂盒(测红细胞)(紫外比色法)说明书
英文名称:Hexokinase assay kit
产品规格:30管/28样
发货周期:1~3天
发货周期:1~3天
检测指标:己糖激酶;HK
应用6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G-6-PD)的偶联反应,在提供足量的底物条件下,在340nm波长处,通过测定吸光度的增加值本试剂盒可测各种动物红细胞、全血等样本中己糖激酶活性。己糖激酶广泛存在于以糖为能源的细胞,但在酵母、肝脏、肌肉、脑等最多。该酶可被结晶化。动物的己糖激酶是作为同工酶而存在的。己糖激酶遗传性缺乏是导致非球形细胞溶血性贫血的原因之一。建立红细胞HK的测定方法对研究不明原因的溶血极为重要。
优点如下:
1、快速简便:全程约1小时,可测50例左右样本。
2、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
3、再现性好:变异系数CV=1.2%。
4、回收试验: X =104%。
5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒I亚群探针法荧光定量RT-PCR试剂盒USP28英文名称SLITRK3肾刷状缘抗体
Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒J亚群RT-PCR试剂盒Urokinase英文名称SLITRK4FLAG Tag标签抗体(N端)
Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒J亚群染料法荧光定量RT-PCR试剂盒URAT1/SLC22A11英文名称SLITRK5FAM166A蛋白抗体
Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒J亚群探针法荧光定量RT-PCR试剂盒C14orf130英文名称SLITRK6脂肪酸合成酶抗体
Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒K亚群RT-PCR试剂盒USP3英文名称SNAIL + SLUG脑型脂肪酸结合蛋白抗体(C端)HPLC≥98%抗Sa抗体检测试剂盒20mgLEP
Roxatidine规格:美国进口BR,98%>98.0%(GC)5gSDF-1βDiosgenyl-3-di-β-O-glucopyranosideAnti-NR2B/NMDAR2B谷氨酸受体2B抗体Anti-NR2B/NMDAR2B谷氨酸受体2B抗体48T/96THPLC≥98%抗Mi2抗体检测试剂盒20mgLEPR
BR,98%97%,用于GC衍生化,含1%TBDMSCl1kgCKMBDiosgeninAnti-Phospho-NMDAR2B(Tyr1070)酸化谷氨酸受体2B抗体Anti-Phospho-NMDAR2B(Tyr1070)酸化谷氨酸受体2B抗体48T/96THPLC≥98%抗M2胆能受体抗体ELISA试剂盒10mg
BR,98%97%,用于GC衍生化,含1%TBDMSCl250gNFATC1AmicarbalideAnti-Phospho-NMDAR2B(Tyr1472)酸化谷氨酸受体2B抗体Anti-Phospho-NMDAR2B(Tyr1472)酸化谷氨酸受体2B抗体48T/96TBR,98%97%,用于GC衍生化,含1%TBDMSCl1gACV-ABisdemethoxycurcuminAnti-NR2C/NMDAR2C谷氨酸受体2C抗体Anti-NR2C/NMDAR2C谷氨酸受体2C抗体48T/96THPLC≥98%抗Ku抗体检测试剂盒20mgFBLN1
BR,98%99%5gHSLSilydianinAnti-NR2D/NMDAR2D谷氨酸受体2D抗体Anti-NR2D/NMDAR2D谷氨酸受体2D抗体48T/96THPLC≥98%抗IVIgG抗体ELISA试剂盒20mgBPA
BR,99%99%1gKLK1SilychristinAnti-N-Ras原癌基因抗体Anti-N-Ras原癌基因抗体48T/96THPLC≥98%抗IL6自身抗体ELISA试剂盒20mgDHT
己糖激酶测定试剂盒(测红细胞)(紫外比色法)说明书anti-Bullous Pemphigoid 180 antibody黄芪皂苷I
Menotropin红景天素
Agrin似梨木双黄
Macrophage Migration Inhibitory Factor辣椒素
macrophage inflammatory protein 1β曲克芦
Macrophage Inflammatory Protein 3β草质素苷
Macrophage Inflammatory Protein 3α(R型)原人参二醇
Macrophage Inflammatory Protein 2硬脂酸酯
Macrophage Inflammatory Protein-1α知母皂苷元
Macrophage Scavenger Receptor 1根皮素
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的,虽然经过校正,测定的结果还是存在一定的误差。 此外,进行紫外吸收法测定时,由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化,因此要注意溶液的pH值,测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。 1. 280nm的光吸收法 因蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm处具有最大吸收,且各种蛋白质的这三种 氨基酸 的含量差别不大,因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法。 测定时,将待测蛋白质溶液倒入石英
常因pH的改变而有变化,因此要注意溶液的pH值,测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。1.280nm的光吸收法因蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm处具有最大吸收,且各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大,因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法。测定时,将待测蛋白质溶液倒入石英比色皿中,用配制蛋白质溶液的溶剂(水或缓冲液)作空白对照,在紫外分光度计上直接读取280nm的吸光度值A280。蛋白质浓度可控制在0.1~1.0mg/ml左右。通常用1cm光径
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