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- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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24
- 英文名：
The total protein assay kit ( with standard : BCA method )
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
详见说明书
一、总蛋白定量测定试剂盒(带标准：BCA法)(比色法)价格分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：总蛋白定量测定试剂盒(带标准：BCA法)(比色法)价格英文名称：The total protein assay kit ( with standard : BCA method )
产品规格：100管/96样|50管/48样
发货周期：1～3天
发货周期：1～3天
检测指标：总蛋白
本试剂盒可测各种动物血清（浆）、组织、培养细胞、细胞培养上清及植物等样本中的蛋白含量。BCA(bicinchonininc acid)与二价铜离 子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂，混合一起即成为苹果绿，即BCA工作试剂。在碱性条件下，BCA与蛋白质结合时，蛋白质将Cu2+还原为Cu+，一个 Cu+螯合二个BCA分子，工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物，最大光吸收强度与蛋白质浓度成正比。
试剂盒特点：
1、 操作简单，快速，45分钟内完成测定，比经典的Lowary法快4倍且更加方便；
2、 准确灵敏：试剂稳定性好，BCA试剂的蛋白质测定范围是20-200μg/ml。
3、 经济实用，除试管外，测定可用微板法操作，大大节约样品取样量；
4、 抗试剂干扰能力比较强，如去垢剂，尿素等均无影响
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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总蛋白定量测定试剂盒(带标准：BCA法)(比色法)价格Follicle-stimulating hormone维生素B12
thyrotropin-releasing hormone5-O-基维斯阿米醇苷
Thyroid Stimulating Hormone芸香柚皮苷
thyroid-stimulating hormone receptor antibody告达庭
luteotropic hormone原苏木素B
Erythropoietin receptor愈创木酚
Erythropoietin antibody地辛
Erythropoietin刺芒柄花素
Estrogen Receptor脱水穿心莲内酯
Estrogen Receptor5-羟色胺
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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文献和实验称取标准维生素A，置于容量瓶中，用氯仿溶解，配成100IU/mL 的标准液。 二、材料 鱼肝油。 三、器材 试管1.5×15cm（×10）;移液管10mL（×1）, 1 mL（×11）；容量瓶25mL（×10），带塞锥形瓶250mL（×1），研钵，分光光度计。 操作方法 一、制作标准曲线 将维生素A标准液用氯仿稀释成不同浓度的标准系列（如10，20，30，40，50，60，70，80，90，100IU/mL）。再取相同数量比色杯，顺次加入1mL氯仿和1mL标准
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实验55 氨基酸含量的测定（茚三酮比色法） 原理 凡含有自由氨基的化合物，如蛋白质、多肽、氨基酸的溶液与水合茚三酮共热时，能产生紫色化合物，可用比色法进行测定。氨基酸与茚三酮的反应分两个步骤。第一步是氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛、茚三酮被还原成还原型茚三酮；第二步是所形成的还原型茚三酮与另一个茚三酮分子和NH3缩合生成有色物质。
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