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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
A 549; A549; NCI-A549; A549/ATCC; A549 ATCC; A549ATCC; hA549
- 库存:
1×10^6
- 供应商:
澳音生物
- 肿瘤类型:
--
- 细胞类型:
上皮细胞
- 品系:
--
- 组织来源:
肺部
- 相关疾病:
肺癌
- 物种来源:
--
- 免疫类型:
--
- 细胞形态:
上皮样
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 器官来源:
肺
- 运输方式:
复苏发货或干冰冷冻发货
- 年限:
--
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
T25
A549非小细肺癌细胞(通过STR鉴定)
以上产品图片均为本公司细胞出入库时拍摄
培养条件:
培养基:F-12K 90%,FBS 10%
气相:空气,95%;二氧化碳,5%。
温度:37摄氏度。
参考传代周期:每周2-3次
参考传代比例:1 : 3
备注:培养时保持细胞密度在6000 到 60000 cells/平方厘米,不要超过70000 cells/平方厘米
参考换液频率:每周2-3次
冻存液配方:完全培养液95%,DMSO 5%
STR信息:
描述:由D.J. Giard等人建立于1972年。M. Lieber发现A549可以通过胞苷二磷酸胆碱途径合成高比例的不饱和脂肪酸卵磷脂。该细胞复苏后不耐低温和长时间运输,复苏后沿途最低温度需高于10摄氏度且运输路途不可过长。冬天常温邮寄A549细胞时会有细胞脱落、坏死等现象,请尽量选用干冰冷链快递。
仅供研究之用。
ATCC图片:
ECACC参考图片:
上海澳音生物参考图片:
收到货后处理方式:
1.细胞冻存管: 收到货物后,请检查箱子里面是否还有干冰。
● 若干冰已剩余不多,不能掩埋冻存管,请及时拍照,并第一时间联系销售。
● 若干冰充裕,可以安排复苏细胞,复苏方法参考【说明书】;不安排复苏,请将细胞冻存管转移到液氮进行保存。短期(一周内)的存放可以放在-80冰箱,建议最好保存在液氮中。
2.培养瓶的活细胞: 收到请检查培养瓶是否完好,是否有漏液,培养基是否浑浊
●若出现以上问题请于当天和我们销售取得联系,我们会第一时间为您处理。
● 若以上问题都没有出现:拆掉培养瓶的外包装,在显微镜下对细胞进行多个视野,不同倍镜拍照。然后用酒精对瓶身进行彻底消毒,放在37度二氧化碳培养箱中进行复温。1-2小时后,拿出在显微镜下观察,并进行多个视野不同倍镜拍照。若细胞达到了可以传代的密度,请按照【说明书】的传代方法进行操作。若细胞密度不能进行传代,请回收培养瓶中的培养基,留适量培养基在瓶中,并将培养瓶放在培养箱继续培养即可(个别细胞除外,详见说明书)
仅供研究之用
联系我们:
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文献和实验2: 个人认为很可能是操作过程中混入其它细胞所致,由于这两株细胞的形态差异较大,因此在没有十分严格的鉴定标准的情况下,建议采用两者方法: 1、重新获取细胞,复苏较早保存的细胞,或者从邻近实验室或者ATCC等细胞库购买低代次的A549。 2、传代是以1000-2000 cells/60mm dish的密度接种细胞,连续培养10
我也在养A549细胞,也来讲讲自己的经验,希望大家共同学习。我们主要是看细胞的密度,大概有80-90%铺满培养瓶底就可以传代了,时间长短不一,大概有5-7天吧,一瓶一般传3-4瓶,中间一般会有一次换液的。培养基用的是1640+10%的小牛血清+200u/ml庆大霉素。传代时先倒掉就培养基,然后用PBS洗一两次,然后再用0.25%胰酶消化(100ml培养瓶盖住表面大概要两滴管左右),可镜经下观察细胞间已出现细胞胞质回缩变圆,缝隙变大(我的细胞大概要2min左右),即可倒去消化液,加入培养基,吹打细胞
我养了三种贴壁的细胞,用同样的消化方法,都很好。这三种细胞是A549,ECV304,2BS。1、0.25%胰酶新鲜解冻,不需要预热。2、倒掉培养瓶中的培养基,并用预冷的D-Hank‘s洗两次(要冷,用前4度中取出)。3、加入约1-2ml的胰酶,晃动瓶子,使液体浸润瓶底。4、超净台上放置约1-2分钟(2BS需要的时间更短,约1分钟)5、镜下观察(我一般都省略了,因为每次的效果都很好),见细胞变圆或细胞间隙变大,即可加入含血清的培养基终止消化。(我们的胰酶都不去掉)6、从瓶口到瓶底吹打,可见细胞
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