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- 英文名:
Western Blocking Reagent
- 规格:
100 ML
蛋白印迹封闭试剂,溶液
solution, sufficient for 10 blots (11921673001 [100 cm2]), sufficient for 60 blots (11921681001 [100 cm2])
别名:
蛋白印迹封闭液
应用
质量
每个批次都经过功能测试(斑点印迹)。外形
Western Blocking Reagent(Western 封闭液)是一种 10x 浓缩液,它含有 10% 纯化的酪蛋白,溶解于马来酸缓冲液中。制备说明
工作溶液:制备工作溶液- Tris 缓冲液(TBS),pH 7.5
在 800 ml 双蒸水中添加 6.05g Tris 碱(50mM)和 8.76g 氯化钠(150mM),并用约 9.5 ml 1M 盐酸调节 pH 值至 7.5。然后用双蒸水稀释至 1L。在 2-8°C 下,TBS 可稳定储存 3 个月。
注意:叠氮hua钠对 POD 有抑制作用,因此在使用 POD 复合物时,不得将叠氮hua钠用作抗菌剂。
| 11921673001 | Western Blocking Reagent, 100 | Western Blocking Reagent, 100 ,阻断剂 |
| 10799068001 | Interleukin-2,human(hIL-2),rec | Interleukin-2,human(hIL-2),rec,白介素-2,人 |
| 11011456001 | Interleukin-2,human(hIL-2), re | Interleukin-2,human(hIL-2), re,白介素-2,人 |
| 11074547001 | Insulin-Transferrin-Selenite S | Insulin-Transferrin-Selenite S |
| 12140349001 | M30 Cytodeath, 250 tests | M30 Cytodeath, 250 tests,M30单克隆抗体 |
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文献和实验2:背景高 (1) 膜没有完全均匀湿透 使用 100% methanol 浸透膜。 (2) 洗膜不充分 增加洗液体积和洗涤次数。 (3) 阻断不充分 增加封闭液孵育时间,或者提高温度。选择合适的封闭试剂(脱脂奶粉,BSA,酪蛋白等)。 (3) 二抗浓度过高 降低二抗浓度。 (4) 检测过程中膜干燥 保证充分的反应液,避免出现干膜现象
【原创】暗室实验(化学发光底物检测方法)及Western Blot实验优化方法
有多少种不同稀释浓度。通常,一种或两种一抗的稀 释度是用两种或三种不同的二抗稀释度进行测定的。例如:1/1000 的一抗和1/50000 的二抗;1/1000 的一抗和1/100000 的二抗;1/5000 的一抗和1/50000 的二抗;以及1/5000 和1/100000 的二抗。 3. 将膜放在滤纸上。将抗原稀释液点在膜上。用尽可能小量的稀释液点在膜上(2-5 ul 为宜),因为用的体积越大,信号越弥散。抗原溶液在膜上干10-30 分钟或直至无可见的水分。 4. 用含0.05
Fas(CD95/APO-1)分子已被证实是一种细胞表面的受体,可与Fas配体(FasL)结合,介导细胞凋亡。本法利用抗-Fas-生物素通过蛋白印迹法、流式细胞分析或免疫组化染色检测Fas/Apo-1分子。 【样本来源】 (1) 单层粘附细胞; (2) 细胞悬液; (3) 组织切片细胞提取物。 【材料与试剂】(Roche公司试剂盒) (1) 鼠抗人-Fas-Biotin; (2) 封闭缓冲液: 0.1mol/L Tris
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