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- 百奥莱博
- MT0029-FLA
- 北京
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
112
- 英文名：
Bst DNA/RNA Polymerase 3.0
- 保质期：
3年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
1600U|16000U
特别提示：包括Bst DNA/RNA聚合酶3.0在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：Bst DNA/RNA聚合酶3.0
英文名称：Bst DNA/RNA Polymerase 3.0
产品货号：MT0029
产品规格：1600U|16000U
本品与Bst DNA 聚合酶（大片段）相比，Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶具有更佳的等温扩增活性和更强的逆转录活性。无论以DNA还是RNA为模板，Bst3.0 DNA/RNA 聚合酶都具有5’-3’的DNA聚合酶活性和强烈的链置换活性，但该酶5’-3’和3’-5’的外切酶活性缺失。 在以RNA为模板的LAMP实验中，可实现单酶系统反应。该酶在60-70℃之间具有很好的反转录活性，可有效解决具有二级复杂结构的RNA模板的反转录，而Bst DNA 聚合酶（大片段）无此活性。
产品应用：
1．同时具有较强的延伸能力和逆转录活性；
2．耐热性能极强，对于复杂模板的扩增活性强；
3．强烈的链置换活性，可应用于LAMP检测。
产品特点：
1．恒温PCR扩增；
2．DNA LAMP和RT-LAMP
3．链置换基因合成
4．在60-70度之间具有反转录活性，可用于单管RT-PCR
产品组成：
| 组分 | 1600U | 16000U |
| Bst DNA Polymerase 3.0（8 U/μl) | 200μl | 2ml |
| 10×Bst Buffer | 1ml×2 | 20ml |
| 100 mM MgSO4 | 500μl | 5ml |
保存条件：-20℃保存，有效期3年。
单位定义：一个活力单位即在65℃条件下，30分钟内催化25nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
反应实例：
A:以pEasy质粒为模板，应用Bst3.0 DNA聚合酶和六对引物进行LAMP实验（70℃，30分钟），1-6分别为：模板0、5ng、2.5ng、1.5ng、1ng、0.5ng，M：DNA Marker2000；B：以140ng human RNA为模板，应用Bst3.0 DNA聚合酶和六对引物进行LAMP实验（70℃，30分钟），1-3：140ng human RNA为模板，4：不加模板，M：M：DNA Marker2000；
以DNA/RNA为模板进行LAMP扩增反应体系配制：
| 加入物 | 加入量 |
| Bst DNA Polymerase 3.0（8 U/μl) | 0.25-1μl |
| 10×Bst Buffer | 2.5μl |
| 100mM MgSO4 | 1.5μl |
| dNTP Mixture(10mM each) | 3.5μl |
| 模板RNA或DNA | 1 ng~1μg |
| *10×LAMP Primer Mix | 2.5μl |
| ddH2O | Up to 25μl |
| 70℃孵育30分钟~1h。 | |
*10×LAMP Primer Mix：各引物组分: FIP/BIP: 16μM each;Loop F/R: 4μM each; F3/B3: 2μM each
注意事项：
1．MgSO4的使用浓度为6~10 mM浓度，1×Bst Buffer中已包含2 mM MgSO4，可自行调整。
2．有文献报道加入Tte Uvrd解旋酶可改善LAMP的效果。
3．使用无模板作为对照检测扩增的特异性。
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文献和实验合成是以DNA的一条链为模板而进行的，所以这种转录方式又叫做不对称转录。②都以四种三磷酸核苷的底物，原料；③都遵循DNA与RNA之间的碱基配对原由，A=U，T=A，C=G，合成与模板DNA序列互补的RNA链。④RNA链的延长方向是5’→3’的连续合成。⑤需要Mg2+或Mn2+离子。⑥并不需要引物。RNA聚合酶缺乏3’→5’外切酶活性，所以没有校正功能。 RNA聚合酶催化下列反应： 大肠杆菌RNA聚合酶的研究得比较透彻的，这是一个分子量达50多万，全酶由五咱亚基组成，去掉δ
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