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- 一基
- 上海
- YJKG2711
- 2025年07月14日
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文献和实验调整终体积为250ml，pH 5.2，灭菌后贮存在4℃条件下备用。 试验程序 1. 取新鲜植物材料0.5~1g，冷冻干燥。如果必要可加入0.2g砂一起研磨，然后加入 10ml RNA抽提掖充分混匀。 2.4℃条件下8000rpm离心10min.，将上层水相转移至一干净离心管中，加入等体积的酚/氯仿抽提掖，在4℃条件下8000rpm离心10min.。 3.上清液转移至一干净离心管中，再用10ml氯仿洗上清液1次(加入10ml氯仿充分混匀后，在4℃
我收集的几个Northern杂交protocol（同位素，DIG，生物素等），供大家参考！
1.7ml 2-ME贮存在4℃条件下备用。 RNA重悬液：2mol LiCl 10mmol NaAc 调整终体积为250ml，pH 5.2，灭菌后贮存在4℃条件下备用。 试验程序 1． 取新鲜植物材料0.5~1g，冷冻干燥。如果必要可加入0.2g砂一起研磨，然后加入 10ml RNA抽提掖充分混匀。 2．4℃条件下8000rpm离心10min.，将上层水相转移至一干净离心管中，加入等体积的酚/氯仿抽提掖，在4℃条件下8000rpm离心10min.。 3．上清液转移至一干净离心管中，再用10ml
2 2.0ml 5mmol/L dNTP 10.0ml [a-32P]dCTP 10.0ml 0.1mol/L DTT 2.0ml Rnasin 20U 加水至48ml 反转录酶(200000 单位/ml) 2ml 混匀后,稍稍离心，37℃保温2 小时。 (2) 反应完毕后加入下列试剂： 0.5mol/L EDTA (pH8.0) 2ml 10% SDS 2ml (3) 加入3ml 3mol/L NaOH。68℃保温30 分钟以水解RNA。 (4) 冷却至室温
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