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文献和实验以无氧气体充填,以保持厌氧状态。 3.某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需连续两次继代培养才能正常生长,此时请将步骤二(2)重复一次。 液氮超低温保藏程序 1、容器的选择:使用带螺旋盖的2ml塑料安培瓶。 2、检查安培瓶是否渗漏:用0.05%的亚甲基蓝水溶液在4℃浸泡30-45分钟,冲洗干净,弃去含有蓝色染料的安培瓶,其余的安培瓶备用。 3、打印标签(激光打印)。 4、容器的灭菌:先用蒸馏
即水饱和的溴酚蓝液。在15ml灭菌离心管中,依次加入以下各种成分:4.0ml 10 × FA buffer3.1ml 甲酰胺2.0ml 100%的甘油720ul 37%的甲醛80ul0.5M的 EDTA (PH 8.0)16ul 水饱和的溴酚蓝100ul DEPC水混匀,分装,-20℃保存,常用放4℃保存。5、1×甲醛变性胶电泳缓冲液(1×running buffer):20 ml 10×FA gel buffer,4.0 ml 37%的甲醛,176 ml水,放入电泳槽中使用,一般在3次电泳结束后需
,利用重力使胶片掉落到染色缸中。若要进行蛋白质转印,则胶片不能染色,要浸入转印缓冲液中。 13) 在CBR 中染色约30 min,染色盘要加密盖,置于旋转平台慢速50 rpm 摇荡的;要注意胶片是否完全没入染色液中,否则会造成染色不均匀。 14) 染色后小心把CBR 染剂倒回原来瓶中,整块胶片变成蓝色,先用自来水洗掉残余的染色液,再倒入约20 mL 脱色液,加密盖后再放回旋转平台摇荡。染色脱色过程请戴手套,否则会在胶片上留下指纹。 15) 胶片的蓝色背景渐渐脱掉,待脱色液转成蓝色后,可以换新
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