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文献和实验从第11列孔各吸取25 μL弃之,设第12列孔为红细胞对照。 D. 自右向左依次向各孔加入25 μL 1%的鸡红细胞悬液。 E. 将反应板置于微量振荡器上振荡1 min,室温(20-25℃)静置45 min后观察结果,若环境温度过高,可于4℃静置60 min,红细胞对照孔成明显的纽扣状沉到孔底时即可判定结果。 2.3 结果判定 A. 在红细胞对照孔出现正确结果的情况下,将反应板作45°倾斜,观察红细胞是否完全凝集。以完全凝集的病毒最大稀释度为该抗原的血凝滴度。完全凝集的病毒的最高稀释
烷基硫酸钠(SDS);三羟甲基氨基甲烷(Tris);乙二胺四乙酸(EDTA);饱和酚;氯仿;异戊醇;无水乙醇;75%乙醇;蛋白酶K;RNase酶;手术剪刀、镊子、吸水纸;微量取液器;研钵、1.5mL 离心管、一次性手套、1.5mL离心管架、记号笔…… 试剂配制 1.Tris-HCL 1mol/L PH8.0 50ml 配制方法:40ml双蒸水,6.057g固体Tris放入烧杯中溶解,用浓盐酸调PH值到8.0,转移到50ml容量瓶中,加入双蒸水定容,摇匀后,转到准备好的输液瓶中,贴上标签,高压灭菌后,降至室温
,分装,实验前加热溶解置56℃-60℃水浴箱中平衡温度备用)。 免疫电泳用玻片 待检血清 人IgG(1mg/ml) 抗人全血清抗体(购自北京中山公司) 微量加样器及塑料吸头 尖吸管及橡皮吸头 打孔器、解剖刀、尺、打孔模板、湿盒等。 电泳仪:将pH8.6巴比妥缓冲液注入电泳槽内(注意正负极各槽内所加入的量应在同一水平)。并将滤纸裁至适当长度和宽度以备搭桥使用。 三、实验方法 1.将溶化的1%离子琼脂倾注于玻片上制成琼脂板。 2.琼脂板冷却凝固后,按照模板于挖槽线上下两侧各打一个孔
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