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- 上海
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- 2025年07月10日
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文献和实验。 8. 通过考马斯亮蓝染色观察蛋白质泳带。 9. 从胶上切下目标带，将其放到微量离心管中，用 1 ml 50% 乙腈洗两次，每次 3 min。 10. 用胰蛋白酶消化胶中的蛋白质，再将肽电洗脱。 11. 通过窄孔高效液相色谱分离肽。将收集的肽在 ABI 477A 或 494A 机器上进行自动 Edman 降解测序。
1.塑料离心管：62.刻度离心管：13. 滴管：长： 1 吸酚：氯仿混合液中： 1 吸乙醇短(钝口) ： 1吸DNA水溶液4.细玻棒：15.移液管：16.微量取样器17.手套：1副8.离心机9.紫外分光光度计10.37℃水浴，50℃水浴11.组织捣碎器12.电泳仪及电泳槽试剂1.裂解缓冲液：50mmol/l Tris—Hcl pH7.420mmol/lEDTA、0.5%SDS100mmol/l NaCl配法： 1mol/l Tris—HCl pH7.4 50ml 20%SDS 25ml 2mol
1 样品RNA的抽提①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的氯仿，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚氯仿相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15
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