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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
HiFi DNA Polymerase
- 保质期:
切勿冻存,有效期24个月
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件:
长时间储存于4℃
- 规格:
4×250 units
产品介绍:
高保真DNA聚合酶 HiFi DNA Polymerase 是一种通过基因改造的工程酶,相较于一般的DNA聚合酶对DNA有更高的亲附性,能显著的提高DNA的持续合成能力,有效的提高PCR产物。本品具有优良5’→3’聚合酶活性及3’→5’外切酶活性(校读活性),其优异外切酶活性能有效的降低错配的发生概率,保证了扩增的准确性,具有很高的保真性,是普通Taq酶的100倍; HiFi DNA Polymerase 具有较普通DNA聚合酶更快的合成速度,广泛的适用于含高GC、高AT在内各种底物模板进行长片段高效,高保真的扩增。
■产品组成:
| 产品名称 | 包装规格 | |
| ZY1091 | ZY1094 | |
| HiFi DNA Polymerase (1U/μl) | 250 μl | 4*250 μl |
| 5× Hi-Fi delity Buffer | 5 ml | 5 ml |
■贮存溶液:
| Tris-HCl(pH8.0) | 20 mM |
| KCl | 100 mM |
| EDTA | 0.1 mM |
| DTT | 1 |
| Tween 20 | 0.5% |
| Nonidet P-40 | 0.5% |
| Glycerol | 50% |
■保存:
-20℃长期保存,保质期2年。
■用途:
高保真PCR扩增,测序文库扩增,PCR产物平末端链接,位点特异性突变等。
■活性定义:
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。
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文献和实验;外切酶活性也要求有单链DNA为起始作用底物,但一旦开始后,便可作用于双链区。DNA聚合酶Ⅲ是细胞内DNA复制所必需的酶,缺乏该酶的温度突变株在限制温度(non permissive temperature)内是不能生长的,此种突变株的裂解液也不能合DNA,但加入DNA聚合酶Ⅲ则可以恢复其合成DNA的能力。 DNA聚合酶Ⅲ的组成 亚基 分子量(×103) 其它名称 a 140 dnaE蛋白,polC蛋白 ε 25
,高于75mmol/L时明显抑制该酶 的活性. (三)忠实性 TaqDNA聚合酶具有5"→3"聚合酶活性和5"→3"外切酶活性,而无3"→5"外切活 性,它不具有Klenow酶的3"→5"校对活性.因而,在PCR反应中如发生某些碱基的错 配,该酶是没有校正功能的.Taq DNA聚合酶的碱基错配机率为2.1×10 -4 . (四)抑制剂 低浓度
用的克隆试剂盒是针对3"末端单个腺嘌呤碱基突出的粘性末端而设计的,怎么办? 用Taq DNA聚合酶处理PCR产物的平末端。首先用酚、氯仿抽提及2倍异丙醇沉淀,纯化DNA,然后将纯化后的DNA溶于1× Thermopol Reaction Buffer(随Taq DNA聚合酶提供),再加入1个单位的Taq DNA聚合酶和200 μM dATP,混匀,72°C温育20分钟。 能否用VentR或Deep VentR DNA聚合酶来处理Taq DNA聚合酶产物,得到平滑
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