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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
PCR标本处理液
- 保质期:
-20℃保存2年
- 供应商:
上海泽叶生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
盒
PCR标本处理液
产品简介
本产品是进行直接PCR的样本预处理液,适用于动物、植物等各类组织、细胞等结构的预处理。操作简便,免除了提取基因组DNA的繁琐步骤,进而可以极大地节省实验时间。本产品搭配泽叶生物研发的PCR预混溶液FS™ Mix可以灵敏特异地完成扩增反应。
产品组成
| 货号 |
Extraction Solution |
Neutralization Solution |
| ZY9051 |
10 ml |
1 ml |
| ZY9052 |
40 ml |
5 ml |
保存条件
室温保存。
质量控制
质量检测表明不含内切或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。
使用方法
组织:取3-5mg组织置于1.5ml离心管中,加入180 μl Extraction Solution,充分涡旋振荡,95℃温浴10min。加入20 μl Neutralization Solution,充分涡旋振荡,5,000rpm离心2min,取0.5-2 μl上清进行扩增。
头发:取两根带毛囊的头发,剪下带毛囊的发根放入1.5ml离心管中,加入180 μl Extraction Solution,充分涡旋振荡,95℃温浴10min。加入20 μl Neutralization Solution,充分涡旋振荡,5000rpm离心2min,取0.5-2 μl上清进行扩增。
口腔拭子:取样前30min内请勿进食及饮水,使用无菌棉签在口腔内擦拭10次。将棉球剪下置于1.5ml离心管中,加入180 μl Extraction Solution,充分涡旋振荡,95℃温浴10min。加入20 μl Neutralization Solution,充分涡旋振荡,5,000rpm离心2min,取0.5-2 μl上清进行扩增。
培养细胞:如果是悬浮培养细胞直接取1×103-104当量的细胞加入到50 μl PCR反应体系中即可。如果是贴壁培养细胞,取3-5mg细胞组织置于1.5ml离心管中,加入180 μl Extraction Solution,充分涡旋振荡,95℃温浴10min。加入20 μl Neutralization Solution,充分涡旋振荡,5,000rpm离心2min,取0.5-2 μl上清进行扩增。
血液、淋巴液DNA病毒:取100 μl血清或淋巴液至1.5ml离心管中,加入180 μl Extraction Solution,充分涡旋振荡,95℃温浴10min。加入20 μl Neutralization Solution,充分涡旋振荡,12,000rpm离心10min,取0.5-2 μl上清进行扩增。
注意事项
处理样本往往不会完全溶解,并不影响PCR反应。只需要少量分散的细胞或核酸组织加入到PCR反应体系中,即可进行反应。泽叶生物设计研发的FS™ Mix)扩增灵敏度高、特异性强,能够获得非常好的扩增效果。
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文献和实验μL 体系 2× MasterMix 25 μL 上游 Primer ( 10 μM 1-5 μL 下游 Primer ( 10 μM ) 1-5 μL 模板 lamid DNA ~ 50 ng genomic DNA ~ 1000 ng cDNA ~ 500 ng 粗提液 ~ 2 μL 灭菌蒸馏水至 50 μL PCR 扩增实例: 一、plasmid DNA 扩增 1.提取的质粒 DNA 扩增 以pUC19 质粒为模板扩增 100,250,500
不同来源的标本的处理及模板制备是PCR反应中关键之一。从理论上讲PCR具有极高的敏感性和特异性,甚至在数小时内通过几十次循环可以检测到一个或几个靶基因目的DNA的存在。但是在实践中人们常会发现,标本的处理和模板的制备不仅影响着PCR反应 的成败,而且影响着其反应的敏感性和特异性。 为了保证PCR反应的顺利进行,十多年来人们已先后建立了许多常规标本处理的方法,但是近年来PCR技术在临床检验中的广泛应用, 要求在保证准确性的前提下,快速
PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
酶。 图 1.非特异性扩增(左图)与使用热启动 DNA 聚合酶进行的特异性扩增(右图)。 如何为您的 DNA 聚合酶选择正确的形式 还有更多需要考虑的因素。选择可以简化您工作流程的聚合酶形式。PCR 聚合酶形式的选择包括即用型预混液、用于直接凝胶上样的含染料缓冲液以及用于直接 PCR 分析的所有必要成分的完整试剂盒。 使用预混液,您只需添加模板和引物,然后,开始 PCR 实验。如果您想进一步减少操作步骤,使用含染料缓冲液的聚合酶允许 PCR 产物直接凝胶上样(注意:确保染料与下游应用兼容)。直接
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