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- 翌圣生物（Yeasen）
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- 2026年01月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Mix
- 保质期：
有效期1年
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件：
-20℃避光保存
- 规格：
50 T
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
| Hifair® Ⅴ Multiplex One Step RT-qPCR Probe Mix | 11146ES50 | 50 T | 1563.00 |
| Hifair® Ⅴ Multiplex One Step RT-qPCR Probe Mix | 11146ES70 | 200 T | 5863.00 |
产品描述
Hifair® Ⅴ Multiplex One Step RT-qPCR Probe Mix是以RNA为模板进行多重定量PCR反应的试剂盒。在实验的过程中，逆转录和定量PCR在同一反应管中进行，简化了实验操作，降低了污染的风险。本试剂盒利用耐热Hifair® Ⅴ Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA，并以此为模板在UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase配合专门针对多重反应优化的Buffer，能够在保证引物扩增效率的同时，进行多达五重的反应。
本试剂盒以预混液形式提供，2×Hifair® Ⅴ One Step mRT-qPCR Mix包含优化的缓冲体系，添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子。
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |
| 11146ES50 (50 T) | 11146ES70 (200 T) | ||
| 11146-A | 2×Hifair® Ⅴ One Step mRT-qPCR Mix | 500 μL | 2 mL |
| 11146-B | RNase free ddH2O | 500 μL | 2 mL |
运输与保存方式
冰袋运输。-20℃避光保存，有效期1年。本品避免反复冻融。建议分装保存。
注意事项
1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
反应体系（以20 μL为例）
| 组分 | 体积（μL） | 终浓度 |
| 2×Hifair® Ⅴ One Step mRT-qPCR Mix | 10 | 1× |
| Primer Mix (10 μM) | 0.4 | 0.2 μM |
| Probe Mix (10 μM) | 0.2 | 0.1 μM |
| 模板 RNA | Total RNA 1 pg-1 μg | |
| RNA Free H2O | to 20 μL |
【注】：使用前务必充分混匀，避免剧烈震荡产生过多气泡。
a）引物浓度：Primer Mix中包含多对引物，通常每条引物终浓度为0.2μM，也可以根据情况在0.1-1.0μM间进行调整。
b）探针浓度：Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针，每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。
c）模板稀释：qPCR灵敏度极高，建议将模板进行稀释使用，控制Ct值在20-35之间适宜。
d）反应体系：推荐使用20 μL或50 μL，以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
e）体系配制：请于超净工作台内配制，并使用无核酸酶残留的枪头、反应管，推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。
f） 参比ROX：ROX内参请另外购买Hieff® 50×High Rox（Cat#: 11145-C）或Hieff® 50×Low Rox（Cat#: 11145-D）。
标准扩增程序
| 反应阶段 | 温度 | 时间 | 循环数 | |
| 1 | 逆转录 | 50℃a | 15 min | 1 |
| 2 | 预变性 | 95℃ | 30sec | 1 |
| 3 | 扩增反应 | 95℃ | 10 sec | 40 |
| 60℃b | 30 secc |
b）扩增反应：扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。
c）荧光信号采集：不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同，请根据最短时间限制进行设置。
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