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- 百奥莱博
- CZ037-DXL
- 北京
- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
220
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
阴凉干燥
- 规格：
10万U/50万U
特别提示：包括T4 DNA连接酶(2000U/μL)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：T4 DNA连接酶(2000U/μL)
产品货号：CZ037
产品规格：10万U/50万U
产品简介：
T4 DNA连接酶在辅助因子ATP的作用下，可催化双链DNA或RNA上的5’-磷酸末端和3’-羟基末端之间形成磷酸二酯键，可用于催化平末端或黏性末端之间的连接反应，也可修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。在DNA片段与载体、Linker或Adaptor DNA的连接中具有广泛应用。
单位定义：
在20 μL 1×T4 DNA连接酶反应缓冲液中，6 μg λDNA/Hind III的酶切产物在16℃下反应30分钟，50%的DNA片段被连接所需的酶量定义为1个活性单位。
失活或抑制：
65℃加热10分钟可使T4 DNA连接酶失活。
产品特点：
高纯度，确保该产品具有最高的活性和纯度，无核酸酶、外切酶、RNA酶、外源DNA/RNA等污染。
操作说明：
1．在冰浴条件下，将下列反应液加入无菌、无核酸酶微量离心管中：
组分 加入体积
10× Reaction Buffer a 2 μL
载体DNA（4 kb） 50 ng（0.02 pmol）
插入DNA（1 kb）b 37.5 ng（0.06 pmol）
无核酸酶dH2O 加至19 μL
T4 DNA连接酶(T4 DNA Ligase)c 1 μL
总体积 20 μL
a．10×Reaction Buffer需于室温下解冻后混匀。
b．插入DNA的加入量需为载体DNA的3倍摩尔量。
c．T4 DNA连接酶需最后加入反应体系中。
2．使用移液器轻柔吹打均匀后，短速离心；
3．对于黏性末端，可于16℃孵育过夜或室温孵育10分钟；对于平末端或单碱基突出片段，则可于16℃孵育过夜或室温孵育2小时；
4．置于65℃加热10分钟，使酶失活；
5．冰浴冷却后，取1～5 μL反应液转化至50 μL感受态细胞中。
我公司销售的T4 DNA连接酶(2000U/μL)优惠促销，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
核苷酸激酶缓冲液中进行。 质量保证： 无核酸内、外切酶污染。每批T4 DNA连接酶均通过模拟克隆实验进行检测，该实验可以检测出待连接DNA末端的任何破坏。结果表明>99.9%的DNA末端未受任何降解。 单位定义(粘性末端活性单位）：在20µl连接反应体系、0.12µM (300µg/ml)的5'-末端浓度条件下，16°C反应30分钟，能使50% 的经Hind Ⅲ消化的λDNA片段连接所需的酶量定义为一个NEB单位。 一个粘端连接活性单位=0.015个韦氏（ATP-PP交换）单位
噬菌体T4DNA连接酶分子也是一条多肽链，分子量为60KD，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。此酶的催化过程需要ATP辅助。T4DNA连接酶可连接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和双链DNA粘性末端或平头末端。另外，NH4C1可以提高在大肠杆菌DNA连接酶的的催化速率，而对T4DNA连接酶则无效。无论是T4DNA连接酶，还是大肠杆菌DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。 DNA连接酶 - DNA连接酶种类 T4DNA连接酶
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