T4 DNA连接酶(2000U/μL)优惠促销

特别提示：包括T4 DNA连接酶(2000U/μL)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：T4 DNA连接酶(2000U/μL)
产品货号：CZ037
产品规格：10万U/50万U

产品简介：
T4 DNA连接酶在辅助因子ATP的作用下，可催化双链DNA或RNA上的5’-磷酸末端和3’-羟基末端之间形成磷酸二酯键，可用于催化平末端或黏性末端之间的连接反应，也可修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。在DNA片段与载体、Linker或Adaptor DNA的连接中具有广泛应用。
单位定义：
在20 μL 1×T4 DNA连接酶反应缓冲液中，6 μg λDNA/Hind III的酶切产物在16℃下反应30分钟，50%的DNA片段被连接所需的酶量定义为1个活性单位。
失活或抑制：
65℃加热10分钟可使T4 DNA连接酶失活。
产品特点：
高纯度，确保该产品具有最高的活性和纯度，无核酸酶、外切酶、RNA酶、外源DNA/RNA等污染。
操作说明：
1．在冰浴条件下，将下列反应液加入无菌、无核酸酶微量离心管中：
组分 加入体积
10× Reaction Buffer a 2 μL
载体DNA（4 kb） 50 ng（0.02 pmol）
插入DNA（1 kb）b 37.5 ng（0.06 pmol）
无核酸酶dH2O 加至19 μL
T4 DNA连接酶(T4 DNA Ligase)c 1 μL
总体积 20 μL
a．10×Reaction Buffer需于室温下解冻后混匀。
b．插入DNA的加入量需为载体DNA的3倍摩尔量。
c．T4 DNA连接酶需最后加入反应体系中。
2．使用移液器轻柔吹打均匀后，短速离心；
3．对于黏性末端，可于16℃孵育过夜或室温孵育10分钟；对于平末端或单碱基突出片段，则可于16℃孵育过夜或室温孵育2小时；
4．置于65℃加热10分钟，使酶失活；
5．冰浴冷却后，取1～5 μL反应液转化至50 μL感受态细胞中。

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