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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
399
- 英文名:
TaqMan microRNA cDNA Synthesis Kit For Serum/Plasma Sample
- 保质期:
2年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
请置于-20℃
- 规格:
25T|100T
特别提示:包括血清/血浆TaqMan microRNA反转录试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:血清/血浆TaqMan microRNA反转录试剂盒
英文名称:TaqMan microRNA cDNA Synthesis Kit For Serum/Plasma Sample
产品货号:MT0007
产品规格:25T|100T
血清/血浆TaqMan miRNA反转录试剂盒采用加A法进行反转录,加A法的反转录效率远高于茎环法,因此,采用该方法可极大的提高检测灵敏度(原理见图 1)。该试剂盒操作简单,仅需要两步即可轻松完成miRNA的cDNA 合成,合成的cDNA 可用于所有 miRNA的后续定量检测。反转录完毕后采用特异性的上游引物和接头引物进行 PCR 扩增,FAM 标记 TaqMan 探针作为荧光报告基团进行定量检测。
Biorab的血清血浆TaqMan miRNA反转录试剂盒专用于血清血浆miRNAs分子的反转录试验(不可用于组织和细胞),转录获得的cDNA产物用于TaqMan定量PCR方法检测miRNAs分子(仅适用Biorab TaqMan miRNA定量PCR试剂盒,货号:MTTxxxxx)。
图 1:血清/血浆TaqMan miRNA 反转录试剂盒原理图
产品组成:
| 组分 | MT0007(25T) | MT0007(100T) |
| 5×TaqMan miRNA RT Solution A | 65μl | 250μl |
| 10×TaqMan miRNA RT Solution B | 65μl | 250μl |
| 10×PS TaqMan miRNA RT Primer | 65μl | 250μl |
| RNase-Free H2O | 1ml | 1ml×2 |
储存:请置于-20℃,可保存2年;避免反复冻融
操作方法:
1.按以下组分在0.2ml EP管中配制应液
血清血浆 miRNA——————————————10μl
5×TaqMan miRNA RT Solution A——————2.5μl
2.在PCR 仪上按以下条件进行加 A 反应:
37℃—————————30分钟
85℃—————————5分钟
3.反应完毕后,在上述12.5μl 反应体系中加入如下试剂,并混合均匀。
10×PS TaqMan miRNA RT Primer——————2.5μl
10×TaqMan miRNA RT Solution B——————2.5μl
H2O 7.5μl
4.在PCR 仪上按以下条件进行反转录反应:
30℃——————5分钟
55℃——————60min
95℃——————5分钟
获得的cDNA 产物可用于多个目标 miRNA的检测。通常取2μl即可用于 TaqMan miRNA 定量 PCR 试剂盒检测(货号:MTTxxxxx),该试剂盒有一万余种,详细列表可查询。
5.利用TaqMan qPCR Kit 对上述miRNA cDNA 产物进行 RealTime PCR 检测。
内参基因可选择使用:TaqMan hsa-miR16 miRNA 定量PCR 试剂盒(货号:MTT01511); TaqMan cel-miR-39 miRNA 定量 PCR 试剂盒(货号:MTT01513)。
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